土壤漆酶活性检测试剂盒

产品内容：
提取液：甲苯50mL×1 瓶，4℃保存。自备。
试剂一：液体30mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉剂×2 瓶，4℃避光保存，临用前每瓶加15mL 试剂一溶解。
测定意义：漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
测定原理：漆酶分解底物ABTS 产生ABTS 自由基，在420nm 处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、震荡仪，甲苯。
测定操作：
一、样本处理
将新鲜土样过40 目筛，按照土样质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10 的比例（建议称取
0.1g 土样，加入1mL 提取液）加入提取液，30℃震荡提取30min，于4℃，10000g，离心10min，取
上清置于冰上待测。
二、测定操作
1. 分光光度计预热30min，调节波长到420nm，蒸馏水调零。
2. 取1mL 玻璃比色皿，加入100μ L 上清液，再加入600μ L 工作液，立即于420nm 处测定吸光值，
记为A1。
3. 记录完数据立即将反应液转移至1.5mL 棕色Ep 管，置于震荡仪上，30℃震荡反应5min， 取出
反应液立即于420nm 处测定吸光值，记为A2。△ A=A2-A1
三、酶活性计算公式
酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
SL 活性（nmol/min/g）= △ A/(ε×d)×V 反总÷（V 样×W÷V 样总）÷T= 38.9×△ A÷W   
ε：ABTS 毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积， 0.7mL；
V 样：反应中样本体积，0.1mL；V 样总：加入提取液体积，1mL； W，样本质量， g；T：反应时间，5min。