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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
ATP Content Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0300-50T/48S
- 规格:
50管/48样
ATP含量检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0300
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×3支 | -20℃保存 |
| 试剂五 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂六 | 粉剂×3支 | -20℃保存 |
| 标准品 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
- 提取液低温条件下,可能有结晶析出,放于60℃水浴加热溶解即可,不影响使用。
- 试剂二:临用前加入7 mL蒸馏水充分溶解,可加热促进溶解,2-8℃可保存4周;
- 试剂四:临用前取1支加入0.2mL蒸馏水溶解,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融;
- 试剂五:临用前加入3.2 mL蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融;
- 试剂六:临用前取1支加入0.25 mL蒸馏水备用,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融;
- 标准品:5 mg ATP。临用前加入0.826 mL蒸馏水配成10 μmol/mL的ATP标准溶液,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融;
- 工作液的配制:临用前请按试剂二(mL):试剂三(mL):试剂四(mL):试剂五(mL):试剂六(mL)=1:1:0.1:0.4:0.1的比例配制(2.6mL,约10T的量),现配现用。
ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP 含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰,NADPH和ATP含量成正比,以此反应ATP含量。
技术指标:
最低检出限:0.0023 μmol/mL
线性范围:0.0390625-2.5 μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、低温离心机、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水、冰和氯仿。
“具体操作步骤详见“产品资料”附件”
注意事项:
- 加入提取液离心后的上清若为浑浊为正常现象。
- 如果吸光值大于1.1,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。注意计算公式中乘以稀释倍数;如果吸光值过低或接近空白,建议加大样本量后进行测定,注意同步修改计算公式。
- 取0.1g兔肺脏加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清,置冰上按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A2测定-A1测定=0.083-0.066=0.017,ΔA标准=A2标准-A1标准=0.430-0.191=0.239,按样本质量计算含量得:
- 取0.1g稗草加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清,置冰上按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A2测定-A1测定=0.511-0.479=0.032,ΔA标准=A2标准-A1标准==0.430-0.191=0.239,按样本质量计算含量得:
- 取兔血清0.1mL 加入1mL 提取液,充分震荡,10000g,4℃离心10min;取上清液至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清置冰上检测,ΔA测定=A2测定-A1测定=0.051-0.038=0.013,ΔA标准=A2标准-A1标准=0.430-0.191=0.239,按液体体积计算含量得:
相关发表文献:
- Meixi Peng, Dan Yang,Yixuan Hou, et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease. March 2019;(IF5.959)
- Yang Wang, Jianhang Jiao, Shanyong Zhang, et al. RIP3 inhibition protects locomotion function through ameliorating mitochondrial antioxidative capacity after spinal cord injury. Biomedicine & Pharmacotherapy. August 2019;116.(IF3.743)
- Luo M,Luo Y, Mao N,et al. Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication. Cellular Physiology and Biochemistry. November 2018.
- Lin X, Wu Y, Chen X, et al. Determination of adenosine phosphate in tobacco leaf by UPLC with phenol-TEA pretreatment [J]. Acta Tabacaria Sinica, 2014, 20(1): 26-31.
- Beutler E, Mathai C K. A comparison of normal red cell ATP levels as measured by the firefly system and the hexokinase system[J]. Blood, 1967, 30(3): 311-320.
BC0060/BC0065 Na+k+-ATP酶活性检测试剂盒
BC0960/BC0965 Ca++Mg++-ATP酶活性检测试剂盒
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- 作者
- 内容
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文献和实验| AuthorCui Tingting, Zhang Yu, Qin Geng, Wei Yue, Yang Jie, Huang Ying, Ren Jinsong, Qu Xiaogang | Publish_toNature Communications |
| IF17.6940 | PMID37031242 |
度。 (2) 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次,得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次,50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便,干扰物少,是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。









