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ATP含量检测试剂盒 紫外分光光度法

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  • ¥980
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC0300
  • 2025年07月15日
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    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      ATP Content Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC0300-50T/48S

    • 规格

      50管/48样


    ATP含量检测试剂盒说明书
    紫外分光光度法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC0300
    规格:50T/48S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体60 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂一 液体50 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂三 液体8 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂四 粉剂×3 -20℃保存
    试剂五 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂六 粉剂×3 -20℃保存
    标准品 粉剂×1 -20℃保存
    溶液的配制:
    1. 提取液低温条件下,可能有结晶析出,放于60水浴加热溶解即可,不影响使用。
    2. 试剂二:临用前加入7 mL蒸馏水充分溶解,可加热促进溶解,2-8℃可保存4周;
    3. 试剂四:临用前取1支加入0.2mL蒸馏水溶解,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融;
    4. 试剂五:临用前加入3.2 mL蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融;
    5. 试剂六:临用前取1支加入0.25 mL蒸馏水备用,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融;
    6. 标准品:5 mg ATP。临用前加入0.826 mL蒸馏水配成10 μmol/mLATP标准溶液,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融;
    7. 工作液的配制:临用前请按试剂二(mL):试剂三(mL):试剂四(mL):试剂五(mL):试剂六(mL)=110.10.40.1的比例配制(2.6mL,约10T的量),现配现用。
    产品说明:
    ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP 含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。

    HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPHNADPH340nm有特征吸收峰,NADPHATP含量成正比,以此反应ATP含量。

    技术指标:
    最低检出限:0.0023 μmol/mL
    线性范围:0.0390625-2.5 μmol/mL

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、低温离心机、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水、冰和氯仿。
    “具体操作步骤详见“产品资料”附件”
    注意事项:
    1. 加入提取液离心后的上清若为浑浊为正常现象。
    2. 如果吸光值大于1.1,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。注意计算公式中乘以稀释倍数;如果吸光值过低或接近空白,建议加大样本量后进行测定,注意同步修改计算公式。
    实验实例:
    1. 取0.1g兔肺脏加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清,置冰上按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A2测定-A1测定=0.083-0.066=0.017ΔA标准=A2标准-A1标准=0.430-0.191=0.239,按样本质量计算含量得
    ATP含量(μmol/g 质量)=0.625×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.625×0.017÷0.239÷0.1=0.445 μmol/g 质量。
    1. 取0.1g稗草加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清,置冰上按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A2测定-A1测定=0.511-0.479=0.032ΔA标准=A2标准-A1标准==0.430-0.191=0.239按样本质量计算含量得:
    ATP含量(μmol/g 质量)=0.625×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.625×0.032÷0.239÷0.1=0.837 μmol/g 质量。
    1. 取兔血清0.1mL 加入1mL 提取液,充分震荡,10000g4℃离心10min;取上清液至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清置冰上检测,ΔA测定=A2测定-A1测定=0.051-0.038=0.013ΔA标准=A2标准-A1标准=0.430-0.191=0.239,按液体体积计算含量得:
    ATP含量(μmol/mL) =6.875×ΔA测定÷ΔA标准=6.875×0.013÷0.239=0.374 μmol/mL。
    相关发表文献:
    1. Meixi Peng, Dan Yang,Yixuan Hou, et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease. March 2019;(IF5.959)
    2. Yang Wang, Jianhang Jiao, Shanyong Zhang, et al. RIP3 inhibition protects locomotion function through ameliorating mitochondrial antioxidative capacity after spinal cord injury. Biomedicine & Pharmacotherapy. August 2019;116.(IF3.743)
    3. Luo M,Luo Y, Mao N,et al. Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication. Cellular Physiology and Biochemistry. November 2018.
    参考文献:
    1. Lin X, Wu Y, Chen X, et al. Determination of adenosine phosphate in tobacco leaf by UPLC with phenol-TEA pretreatment [J]. Acta Tabacaria Sinica, 2014, 20(1): 26-31.
    2. Beutler E, Mathai C K. A comparison of normal red cell ATP levels as measured by the firefly system and the hexokinase system[J]. Blood, 1967, 30(3): 311-320.
    相关系列产品:
    BC0060/BC0065   Na+k+-ATP酶活性检测试剂盒
    BC0960/BC0965   Ca++Mg++-ATP酶活性检测试剂盒

     

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    A neutrophil mimicking metal-porphyrin-based nanodevice loaded with porcine pancreatic elastase for cancer therapy点击查看
    AuthorCui Tingting, Zhang Yu, Qin Geng, Wei Yue, Yang Jie, Huang Ying, Ren Jinsong, Qu XiaogangPublish_toNature Communications
    IF17.6940PMID37031242
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      度。 (2) 吸收系数 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。

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