- ￥660
- Solarbio
- 北京
- BC1390
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Tannic Acid Content Assay Kit
- 库存：
999
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1390-50T/48S
- 规格：
50管/48样
单宁含量检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC1390
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
| 提取液 |
液体75 mL×2瓶 |
2-8℃保存 |
| 试剂一 |
粉剂×1瓶 |
常温保存 |
| 标准品 |
粉剂×1支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、标准品：10 mg单宁酸。临用前加入1.175 mL提取液溶解为5000 nmol/mL的标准液，2-8℃保存两周。
产品说明：
单宁又称植物多酚，是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。单宁可作为潜在的生物标记物；与蛋白质结合的能力又称为收敛性或涩性。其收敛性是多种生理活性的基础，如止血、抗肿瘤、抗衰老等生理活性，也是影响产品口感的因素之一。
根据光谱特性，单宁在275nm下有较强的紫外吸收，通过利用活性炭能够特异吸附单宁的性质来检测单宁含量。
技术指标：
最低检出限：0.385 nmol/mL
线性范围：0.39-18 nmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
将样本烘干至恒重，粉碎，过30-50目筛之后，称取约0.1g，加入2mL提取液（封口膜封口防止液体溅出），于70℃水浴，准确提取30min，期间可摇晃数次。12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至2mL，待测。
二、测定步骤
1. 紫外分光光度计预热30min，波长调至275nm，提取液调零。
2. 标准液的稀释：将标准液用提取液稀释为25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL标准溶液。
3. 标准液稀释可参考下表：
| 序号 |
稀释前浓度（nmol/mL） |
标准液体积（µL） |
提取液体积（µL） |
稀释后浓度（nmol/mL） |
| 1 |
5000 |
100 |
900 |
500 |
| 2 |
500 |
200 |
3800 |
25 |
| 3 |
25 |
2000 |
2000 |
12.5 |
| 4 |
12.5 |
2000 |
2000 |
6.25 |
| 5 |
6.25 |
2000 |
2000 |
3.125 |
| 6 |
3.125 |
2000 |
2000 |
1.5625 |
| 7 |
1.5625 |
2000 |
2000 |
0.78125 |
备注：实验中每个标准管需1000µL标准溶液。
4. 加样表：
| 试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
| 试剂一 |
大约10-15mg |
- |
- |
大约10-15mg |
| 提取液 |
- |
- |
- |
1mL |
| 标准溶液 |
- |
- |
1mL |
- |
| 样本 |
1mL |
1mL |
- |
- |
充分混匀震荡5min，13000g 室温离心20min。取上清液测定275nm下的吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA测定=A对照管-A测定管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管。标准曲线和空白管只需测1-2次。
三、单宁含量计算
1. 标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度（y，nmol/mL）和吸光度ΔA标准（x，ΔA标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定（x，ΔA测定）带入公式计算样本浓度（y，nmol/mL）。
2. 单宁含量计算：
（1）按蛋白浓度计算
单宁含量（nmol/mg prot）=y×V提取÷(V提取×Cpr) =y÷Cpr
（2）按样本质量计算
单宁含量（nmol/g 质量）=y×V提取÷W=2y÷W
Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V提取：提取液体积，2mL。
注意事项：
1. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。
2. 按蛋白浓度计算时，由于提取液中含有破坏蛋白结构的成分，故需要重新提取蛋白进行测定。
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文献和实验度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
