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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Chymotrypsin Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC2330-50T/48S
- 规格:
50管/48样
盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC2330
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂二:临用前溶于4 mL甲醇中,再用水定容至25 mL。可分装后-20℃保存,避免反复冻融。
糜蛋白酶,又称胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似,但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化,对脓性和非脓性痰液均有效;也用于创伤或手术后伤口愈合,如白内障摘除。
糜蛋白酶催化BTEE水解,产物在256nm有特征光吸收;通过测定256nm光吸收增加速率,来计算糜蛋白酶活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
- 当ΔA大于0.2或者吸光值大于1时,建议将样本用提取液稀释后测定。
- 当ΔA小于0.03时,建议将样本浓缩或者增加样本体积进行测定,注意计算公式除以浓缩倍数或者改变体积。
- 取0.1g兔肾脏加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清后再用提取液稀释10倍,之后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A2-A1=1.043-0.94=0.103,按样本质量计算酶活得:糜蛋白酶活(U/g 质量)=3.8×ΔA÷W×10(稀释倍数)=39.14 U/g 质量。
BC2280/BC2285 酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒
BC2290/BC2295 中性蛋白酶(NP)活性检测试剂盒
BC2320/BC2325 胃蛋白酶活性检测试剂盒
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文献和实验一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
度。 (2) 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次,得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次,50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便,干扰物少,是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。









