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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Acid Phosphatase(ACP) Activity Assay Kit
- 库存:
现货
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC2130-50T/24S
- 规格:
50管/24样
酶(ACP)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2130
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体35 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
1、标准品:10 μmol/mL酚标准液,临用前蒸馏水稀释至0.625μmol/mL备用(可以吸取20μL 10 μmol/mL酚标准液和300μL蒸馏水混合备用),稀释后的标准液2-8℃保存一周。
产品说明:
ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
在酸性环境中,ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚,苯酚与4-氨基安替比林和铁*反应生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
1、试剂一、试剂二和试剂三均需避光保存。
2、试剂三变蓝绿色后不能再使用。
3、加入试剂三后必须立即混匀,否则显色不完全。
4、ACP不稳定,尤其在37℃和pH大于7的条件下活力丧失快,因此酸性磷酸酶样本一般需当天准备;血清样本中,每毫升血清中加入10mg柠檬酸氢二钠或者5mg*,使pH降至6.5以下,或5mL血清加入30%*2~3滴,置于4℃可保存1周。
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文献和实验| AuthorJin Zhang, Quan Xu, Yifang Zhang, Mohamed F. Foda, Kai Cai, Qing Liu, Fan Jia, Huadong Wang, Fuqiang Xu, Heyou Han, Huageng Liang | Publish_toBIOMATERIALS |
| IF14.0000 | PMID38100907 |
目的要求 1.熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 基本原理 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内。在溶酶体膜稳定完整时,底物不易渗入,ACP活力微弱或无活性,经固定,在合适pH条件下,膜本身变为不稳定,逐渐改变其渗透性,底物可以渗入,酶活力被显示。 ACP在酸性条件
酸性磷酸酶金属盐―铅法 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)广泛分布于机体各种组织细胞内,主要存在于细胞的溶酶体内.常作为溶酶体标志酶,此外,还存在于内质网和胞质内。在组织退行性变、核酸和蛋白质代谢活动增加时,酸性磷酸酶活性增强。酸性磷酸酶还参与酯类代谢。因此,它在疾病、免疫反应和细胞损伤与修复过程中具有一定生物学意义。 其基本原理是在酸性环境下,底物p―甘油磷酸钠被酸性磷酸酶水解,释放出磷酸,磷酸遇铅离子则生成磷酸铅沉淀,最后与硫化铵作用形成棕褐色硫化铅沉淀。其反应
相关专题 一、实验目的 1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。 2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。 二、实验原理 酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基,在PH5.0 的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在与分布。 本实验的技术特点是:①用冷冻涂片和中性福尔马林固定,可避免在固定、包埋及制片过程中酶的失活
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