- ￥420
- Solarbio
- 北京
- BC2135
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Acid Phosphatase(ACP) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC2135-100T/48S
- 规格：
100管/48样
液酸性磷酸酶（ACP）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2135
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
1、标准品：10μmol/mL酚标准液，临用前蒸馏水稀释至0.625μmol/mL备用（可以吸取20μL 10 μmol/mL酚标准液和300μL蒸馏水混合备用），稀释后的标准液2-8℃保存一周。
产品说明：
ACP（Acid Phosphatase）在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸，常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
在酸性环境中，ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚，苯酚与4-氨基安替比林和铁*反应生成红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算ACP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
组织样本：称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃，10000rpm离心10min，取上清液待测。
血浆（血清）：血液可直接用于测定，如果浓度高的话，用提取液稀释。
二、测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到510nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、试剂一置于37℃水浴中预热30min以上。
3、操作表：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 | 空白管 | 标准管 |
| 蒸馏水 | - | - | 20 | - |
| 标准品 | - | - | - | 20 |
| 上清液 | 20 | - | - | - |
| 试剂一 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 试剂二 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 混匀后置于37℃中保温15min | ||||
| 试剂三 | 120 | 120 | 120 | 120 |
| 上清液 | - | 20 | - | - |
| 混匀后于510nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。空白管和标准管只需做1-2次 | ||||
1、按蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μmol酚为一个酶活力单位。
ACP酶活 (U/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T
=0.0417× (A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr
2、按样本质量计算
活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1 μmol酚为一个酶活力单位。
ACP 酶活 (U/g 质量)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷(W÷V提取×V样)÷T
=0.0417×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
3、按血液体积计算
活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
ACP酶活 (U/mL)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷V样÷T
=0.0417×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)
C标准品：标准品浓度，0.625μmol/mL；V样：加入反应体系中上清液体积，0.02mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；T：反应时间，15min；V提取：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1、 试剂一、试剂二和试剂三均需避光保存。
2、 试剂三变蓝绿色后不能再使用。
3、 加入试剂三后必须立即混匀，否则显色不完全。
4、 ACP不稳定，尤其在37℃和pH大于7的条件下活力丧失快，因此酸性磷酸酶样本一般需当天准备；血清样本中，每毫升血清中加入10mg柠檬酸氢二钠或者5mg硫 酸氢钠，使pH降至6.5以下，或5mL血清加入30% 醋 酸溶液2～3滴，置于4℃可保存1周。
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文献和实验| AuthorZhu Lingcheng, Li Yanzhen, Wang Chengcheng, Wang Zhiqi, Cao Wenjing, Su Jing, Peng Yunjing, Li Baiyun, Ma Baiquan, Ma Fengwang, Ruan Yong-Ling, Li Mingjun | Publish_toNature Plants |
| IF18.0000 | PMID37291399 |
目的要求 1．熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2．观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 基本原理 酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）主要存在于巨噬细胞，定位于溶酶体内。在溶酶体膜稳定完整时，底物不易渗入，ACP活力微弱或无活性，经固定，在合适pH条件下，膜本身变为不稳定，逐渐改变其渗透性，底物可以渗入，酶活力被显示。 ACP在酸性条件
酸性磷酸酶金属盐―铅法 酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)广泛分布于机体各种组织细胞内，主要存在于细胞的溶酶体内．常作为溶酶体标志酶，此外，还存在于内质网和胞质内。在组织退行性变、核酸和蛋白质代谢活动增加时，酸性磷酸酶活性增强。酸性磷酸酶还参与酯类代谢。因此，它在疾病、免疫反应和细胞损伤与修复过程中具有一定生物学意义。 其基本原理是在酸性环境下，底物p―甘油磷酸钠被酸性磷酸酶水解，释放出磷酸，磷酸遇铅离子则生成磷酸铅沉淀，最后与硫化铵作用形成棕褐色硫化铅沉淀。其反应
活动的能源。精子轴丝收缩依赖STP供给能量，而ATP可由果糖分解产代谢产生，故精浆果糖浓度减低将使精子活动力减弱，影响受精率。在先天性精囊缺如时无果糖，医学教育|网搜集整理精囊疾病如精囊炎时果糖下降。 ［参考值］ ≥13μmol/一次射精 （三）酶类 1.酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）精浆中的酸性磷酸酶几乎全部来自前列腺，属前列腺酸性磷酸酶。因此测定精浆中ACP有助于了解前裂腺功能和对前列腺疾病的诊断。前列腺炎时PAP活性减低；前列腺癌和前列腺肥大时
