α-淀粉酶 (AMS) 检测试剂盒 微量法

α-淀粉酶（α-AL）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0615
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体20 mL×1瓶	常温保存
试剂二	液体5 mL×2瓶	2-8℃保存
试剂三	粉剂×2支	2-8℃保存
标准品	粉剂×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 试剂一：若有黄色晶体析出，需加热溶解后再用；
2. 试剂二：临用前取1支试剂三加入1瓶试剂二中，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌粉剂至溶解，用不完的试剂2-8℃保存4周；
3. 标准品：10 mg无水葡萄糖。临用前加1 mL蒸馏水，配成10 mg/mL葡萄糖标准液，2-8℃保存2周。

产品说明：
淀粉水解酶，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)随机催化淀粉中α-1,4-糖苷键水解，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。
淀粉水解酶催化淀粉水解生成还原糖，还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质，在540nm有吸收峰；通过测定540nm吸光度增加速率，计算淀粉酶活性。α-AL耐热，但是β-淀粉酶可在70℃钝化15min。因此粗酶液经过70℃钝化15min，就只有α-AL能够催化淀粉水解。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研钵/匀浆器和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
测定的吸光值大于1.5时，可以对样本进行适当稀释后测定。若吸光值过小，可以浓缩淀粉酶稀释液或者淀粉酶原液。注意同步修改计算公式。
相关发表文献：

1. Yu Z, Yang Z, da Silva J A T, et al. Influence of low temperature on physiology and bioactivity of postharvest Dendrobium officinale stems[J]. Postharvest biology and technology, 2019, 148: 97-106.
2. Chen M X, Zhu F Y, Wang F Z, et al. Alternative splicing and translation play important roles in hypoxic germination in rice[J]. Journal of experimental botany, 2019, 70(3): 817-833.
3. QinYuan,ShangLin,YuanFu,et al. Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus). International Journal of Biological Macromolecules. November 2018;(IF3.909)

参考文献：

1. Hashemi M, Mousavi S M, Razavi S H, et al. Comparison of submerged and solid state fermentation systems effects on the catalytic activity of Bacillus sp. KR-8104 α-amylase at different pH and temperatures[J]. Industrial crops and products, 2013, 43: 661-667.

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