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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Ascorbate Peroxidase(APX) Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0220-50T/48S
- 规格:
50管/48样
抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0220
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 粉剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保 |
| 试剂一 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体0.25mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 提取液:临用前将粉剂一倒入提取液中,溶液为悬浊液,摇匀使用即可,2-8℃可以保存12周。
- 试剂二:临用前加入10 mL蒸馏水充分溶解;2-8℃可以保存1周。(由于试剂稳定性较差,故多给一瓶)
- 试剂三:使用前先离心。临用前根据样本量取适量试剂三用蒸馏水稀释100倍使用即可。
APX(EC.1.11.1.11)是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX具有多种同功酶,分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体,以及过氧化体和类囊体膜上。APX催化H2O2氧化AsA,是植物AsA的主要消耗者。APX的活性直接影响到AsA的含量,在胁迫和解胁迫条件下,APX与AsA具有一定的负相关性。
APX催化H2O2氧化AsA,通过测定AsA氧化速率,来计算得APX活性.
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、低温离心机、移液枪、研钵/匀浆器、水浴锅、冰和蒸馏水。
具体操作步骤详见“产品资料”附件”
相关发表文献:
- Meng C, Quan T Y, Li Z Y, et al. Transcriptome profiling reveals the genetic basis of alkalinity tolerance in wheat[J]. BMC genomics, 2017, 18(1): 24.
- Qin Y, Djabou A S M, An F, et al. Proteomic analysis of injured storage roots in cassava (Manihot esculenta Crantz) under postharvest physiological deterioration[J]. PloS one, 2017, 12(3).
- Zhang Z, Liu H, Sun C, et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice[J]. Journal of plant physiology, 2018, 229: 100-110.
- Zhao Y, Yu W, Hu X, et al. Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense[J]. Gene, 2018, 660: 109-119.
- Djabou A S M, Qin Y, Thaddee B, et al. Effects of Calcium and Magnesium Fertilization on Antioxidant Activities during Cassava Postharvest Physiological Deterioration[J]. Crop Science, 2018, 58(3): 1385-1392.
- Shigeoka S, Nakano Y, Kitaoka S. Metabolism of hydrogen peroxide in Euglena gracilis Z by L-ascorbic acid peroxidase[J]. Biochemical Journal, 1980, 186(1): 377
- Caverzan A, Passaia G, Rosa S B, et al. Plant responses to stresses: role of ascorbate peroxidase in the antioxidant protection[J]. Genetics and molecular biology, 2012, 35(4): 1011-1019.
- 取0.1g小蓟样本加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清,之后按照测定步骤操作,用1mL石英比色皿测得计算ΔA空白管= A1空白管-A2空白管=0.668-0.659=0.009,ΔA测定管= A1测定管-A2测定管=0.958-0.824=0.134,按样本质量计算酶活得:
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文献和实验Potential application of melatonin in reducing boron toxicity in rice seedlings through improved growth,cell wall composition,proline,and defense mechanisms
| AuthorXinyu Li, Muhammad Kamran, Muhammad Hamzah Saleem, Abdullah Ahmed Al-Ghamdi, Fahad M. Al-Hemaid, Mohamed S. Elshikh, Shaopeng Zhao, Muhammad Riaz | Publish_toCHEMOSPHERE |
| IF8.9430 | PMID37257660 |
一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算,酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机;紫外分光光度计;研钵;试管。三、试剂50mmol/L K2PO4-KH2PO4缓冲液(PH7.0,内含0.1mmol/L EDTA-Na2)
度。 (2) 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
实验原理 AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光度值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算,酶活性可用μmolAsA/(g FW•h)表示。 实验试剂 50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液(pH7.0,内含0.1mmol/L
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