脯氨酸含量测定试剂盒（可见光分光光度法）

脯氨酸（Pro）含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0290
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体60mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体45 mL×1瓶（自备）	2-8℃保存
试剂二	液体45 mL×1瓶	2-8℃保存
标准品	粉剂×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 试剂一：自备冰乙酸。
2. 标准品：脯氨酸10 mg，临用前加入1 mL蒸馏水，配成10 mg/mL标准品。

产品说明：
脯氨酸（Pro）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。 
用磺基水杨酸（SA）提取Pro，加热处理后，Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色，在520nm测定吸光度。
技术指标：
最低检出限：0.1791 μg/mL
线性范围：0.5-40 μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器及用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰乙酸、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
“具体操作步骤详见“产品资料”附件”
注意事项：

1. 提取液中含有蛋白沉淀剂，提取的上清液不能用于蛋白浓度的测定。
2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定

相关发表文献：

1. Yanan Wang, Chengzhen Liang, Zhigang Meng, et al. Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton. Environmental and Experimental Botany. June 2019; 162:364-373. (IF3.712)
2. Zeyong Zhang, Huanhuan Liu, Ce Sun, et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of Plant Physiology. October 2018;(IF2.825
3. Huang Q, Wang M, Xia Z. The SULTR gene family in maize (Zea mays L.): gene cloning and expression analyses under sulfate starvation and abiotic stress[J]. Journal of plant physiology, 2018, 220: 24-33.
4. Chen M X, Zhu F Y, Wang F Z, et al. Alternative splicing and translation play important roles in hypoxic germination in rice[J]. Journal of experimental botany, 2019, 70(3): 817-833.
5. Zhao Y, Yu W, Hu X, et al. Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense[J]. Gene, 2018, 660: 109-119.

参考文献：

1. Vieira S M, Silva T M, Glória M B A. Influence of processing on the levels of amines and proline and on the physico-chemical characteristics of concentrated orange juice[J]. Food chemistry, 2010, 119(1): 7-11.
2. Demiral T, Türkan I. Comparative lipid peroxidation, antioxidant defense systems and proline content in roots of two rice cultivars differing in salt tolerance[J]. Environmental and experimental botany, 2005, 53(3): 247-257.

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