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羧酸酯酶(CarE)活性检测试剂盒 微量法

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  • ¥700
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC0845
  • 2025年07月11日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Carboxylesterase(CarE) Activity Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC0845-100T/96S

    • 规格

      100管/96样

    羧酸酯酶(CarE)活性检
    测试剂盒说明书

    微量法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC0845
    规格:100T/96S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体110 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂一 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂二 粉剂×2 -20℃保存
    试剂三 液体40 mL×1瓶 2-8℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂一:临用前取1瓶先加入1.25mL无水乙醇,震荡使其大部分溶解,再加入8.75mL试剂三,震荡至充分溶解,用不完的试剂2-8℃保存一周(1瓶粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1瓶粉剂);
    2. 试剂二:临用前取1瓶试剂二加入8 mL试剂三震荡使其充分溶解,临用前配制本试剂溶解后为淡黄色,且在常温下不稳定,建议根据样本量取适当配好的试剂二置于冰上待用,剩余试剂分装后置于-20℃保存一周,禁止反复冻融。
    产品说明:
    哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。
    CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固蓝显色;在450nm光吸收增加速率,计算CarE活性。

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、研钵/匀浆器、超声破碎仪,蒸馏水,无水乙醇
    操作步骤具体操作步骤详见“产品资料”附件
    注意事项:
    1. 试剂二为-20℃储存试剂,在常温下不稳定,一般常温放置2-3小时即可明显发现液体由浅黄色变为浅褐色(液体变褐色视为变质,不可用)。建议试验前根据样本量计算所需试剂二的用量,在试剂二溶解后,留取所需用量置于冰上待用,剩余试剂可分装后-20℃储存。
    2. 动物组织样本一般稀释8倍或更大稀释倍数后进行操作测定。
    3. 当吸光值大于1时,建议将样本稀释后测量。计算公式注意乘以稀释倍数。
    4. 为保证反应时间的准确性,建议逐一比色;如想用96孔板对多样本同时检测,建议使用排枪,且一次最多8个或12个孔(8道排枪或12道排枪)。
    实验实例:
    1. 取0.1g小鼠肝脏加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清用蒸馏水稀释32倍后按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA空白管=A2-A1=0.148-0.122=0.026ΔA测定管=A2-A1=0.457-0.118=0.339,按样本质量计算酶活得:CarE酶活(U/g质量)=8×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷W×F=8×(0.339-0.026)÷0.1×32=801.28 U/g 质量。
     
    1. 取0.1g小鼠肾脏加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清用蒸馏水稀释8倍后按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA空白管=A2-A1=0.148-0.122=0.026ΔA测定管=A2-A1=0.28-0.124=0.156按样本质量计算酶活得:CarE酶活(U/g质量)=8×(ΔA测定管-ΔA空白管) ×F=8×(0.156-0.026)÷0.1×8=83.2 U/g 质量。
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