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2-8℃
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询客服
- 英文名:
TMB Two-Component Substrate solution(for Elisa)
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝
- 规格:
50ml*2/2*100ml/2*250ml/2*500ml
| 规格: | 50ml*2 | 产品价格: | ¥280.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2*100ml | 产品价格: | ¥360.0 |
| 规格: | 2*250ml | 产品价格: | ¥560.0 |
| 规格: | 2*500ml | 产品价格: | ¥1000.0 |
| PR1210-50 | PR1210-100 | PR1210-250 | PR1210-500 | |
| 显色液A | 50ml | 100ml | 250ml | 500ml |
| 显色液B | 50ml | 100ml | 250ml | 500ml |
产品简介:
目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品研发与生产以及科研需求,本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。
外观与结构:显色液A应为无色或淡黄色透明液体,显色液B应为无色透明液体。均无沉淀、颗粒及絮状物。
用于酶联免疫实验中的显色阶段:可于样本反应,生成深蓝色产物。

使用方法:
加液:待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加底物显色液A、显色液B各50ul(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
终止:每孔加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数:终止反应后15分钟内在450nm处测定各孔溶液的吸光值。
对照:空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
注意事项:
1、实验用品应该专一,避免交叉污染。
2、TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
参考文献:
《Improved Antitumor Efficacy of Combined Vaccine Based on the Induced HUVECs and DC-CT26 Against Colorectal Carcinoma》 作者:Qiushuang Zhang ,Chao Xie , Dongyu Wang ,Yi Yang, Hangfan Liu , Kangdong Liu , Jimin Zhao , Xinhuan Chen, Xiaoyan Zhang ,Wanjing Yang ,Xiang Li ,Fang Tian , Ziming Dong and Jing Lu 期刊:Cells 影响因子:5.656 PMID:30767782
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文献和实验ELISA 实验失败可能由多种因素造成。在实验前阅读并充分了解产品说明书,可以一定程度上避免出现意想不到的结果。参考以下提示来避免实验出现问题。 1. 检查试剂盒的保质期,保证所有试剂按说明书上的建议正确保存; 2. 检查试剂溶液是否存在不稳定或降解迹象,如沉淀或变色等; 3. 底物溶液应为无色; 4. 试剂制备和保存时应使用干净的一次性塑料吸量管、枪头和容器。每次加液(样品、标准品及其他试剂)时,及时更换枪头,避免交叉污染; 5. 确保孵育时间和温度与规定的高度一致; 6. 盒中试剂不能
室所用洗板机3次洗板即可达到要求。 六、显色 在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或 粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37 ℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37 ℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37 ℃下反应25~30分钟后,终止反应比色
作为 ELISA 的最后一步,检测结果的计算对整个实验十分重要。 以夹心法为例。 1. ELISA 的样本通常要设置 1~2 个复孔进行检测,分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的 20%。 2. 样本的 OD(吸光度)平均值要减去标准品浓度为 0 时的 OD 平均值。 3. 建立标准曲线 在对数坐标图上拟合四参数的逻辑函数曲线(X 轴上为标准品浓度,Y 轴为对应的 OD 值)。推荐使用 origin 软件。 详细步骤如下: 第一步: 输入 OD 值










