双链DNA染料(SYBR Green)

特别提示：包括双链DNA染料(SYBR Green)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：双链DNA染料(SYBR Green)
英文名称：SYBR Green I
产品货号：JN0062
产品规格：0.5ml×5

  本品是一种直接与双链DNA结合的荧光染料，是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。在定量PCR中，SYBR Green I可与dsDNA非特异结合后发出荧光。可以通过检测反应体系中的荧光强度达到检测PCR产物扩增量的目的。SYBR Green I在游离状态下发出微弱的荧光，一旦与dsDNA结合，其荧光强度增加1000倍。一个反应发出的荧光信号与出现的dsDNA量成正比，且会随着扩增产物的增加而增加，通过检测PCR反应液中的荧光信号强度，可以对目的基因进行准确定量，同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。

使用建议：
使用浓度对荧光PCR结果的影响；
SYBR Green I的使用浓度是荧光定量PCR实验成功的关键因素。SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出；而SYBR Green I的浓度过高会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为0.2×到1×之间。
Mg2+浓度的影响；
提高Mg2+浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时，Mg2+浓度应比无SYBR Green I 的普通PCR反应高出0.5到3mM。

储存条件：-20℃

除了双链DNA染料(SYBR Green),，我公司还供应以下相关产品：



名称：cDNA第二链合成试剂盒
货号：BTN131005
规格：30次
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。

产品特点：
1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。

试剂盒组成：

成分	规格
5×cDNA第二链合成缓冲液	480μl
20×cDNA第二链合成酶混合液	120μl
0.2 M EDTA溶液	120μl
超纯水	2ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂：

成分	用量
cDNA第一链合成反应液	10μl
超纯水	48μl
cDNA第二链合成缓冲液	16μl
cDNA第二链合成酶混合液	4μl
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μl
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μl

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。