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74
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
20次(1μg)
特别提示:包括pBalbGST-Tev质粒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:pBalbGST-Tev质粒
产品货号:JN0109
产品规格:20次(1μg)
本质粒以XhoI线性化方式提供,请配合BalbRec PCR产物一步无缝克隆试剂盒使用(CatNo. JN0001)。
GST是实验室中zuì常用的融合标签之一,能够促进目标蛋白质的溶解性和正确折叠。Thormbin作为常用的切除GST标签的蛋白酶,常常出现在目标蛋白中,从而限制了其应用。pBalbGST-Tev质粒在 Thombin位点后引入了TEV Protease切点,极大的增加了标签切除的特异性。
目的基因扩增按常规方法设计引物后,在5′端引物前添加以下序列:CTC TAC TTC CAA GGT; 3′端引物前添加:GTC ACG ATG CGG CCG。3′端引物需要加入终止密码子。
产品组成:
| 组份 | 规格 |
| pBalbGST-TEV | 1ug |
| BalbRec 重组酶 | 20μl |
| 10×BalbRec 重组缓冲液 | 50μl |
| Control Insert(50 ng/μl) | 10μl |
| TEV protease | 100U |
| 附赠 | |
| 2×pfu MasterMix (快速上样型) | 1ml |
| 2×Fast Taq MasterMix(快速上样型) | 1ml |
| DNA Ladder 2000 Plus | 100μl |
图例一):pBalbGST-TEV载体表达的Human CBS Recombinant Protein纯化电泳图:
Lane 1: Load sample
Lane 2: Flowthrough
Lane 3: Elution by 10mM GSH
Lane 4: Elution by 10mM GSH
Lane 5: Elution-6M Gua-HCl
Lane 6: 蛋白Marker
图例二):pBalbGST-TEV载体表达的Human CBS Recombinant Protein初步纯化后,30℃下,经不同量的TEV Protease酶切2小时:
Lane 1: No rTEV
Lane 2: 100 units/mg
Lane 3: 400 units/mg
Lane 4: 800 units/mg
Lane 5: Molecular weight marker
质量控制:pBalbGST-TEV线性化载体经过严格的自连测试以及连接效率测试。
我公司销售的pBalbGST-Tev质粒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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pET 系统是在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大系统。根据最初由 Studier 等开发的 T7 启动子驱动系统, Novagen 的 pET 系统已用于表达成千上万种不同蛋白。 控制基础表达水平 pET 系统提供 6 种载体 - 宿主菌组合,能够调节基础表达水平以优化目标基因的表达。没有单一策略或条件适用于所有目标蛋白,所以进行优化选择是必要的。 宿主菌株 质粒在非表达宿主菌中构建完成后,通常转化到一个带有 T7 RNA 聚合酶基因的宿主
,表现为目标基因活性的降低。Klahre等发现通过用携带dsRNA、siRNA和一个表达单链GFP基因RNA的质粒载体的微弹颗粒轰击转GFP基因烟草能够沉默GFP基因的表达。在转GUS基因烟草中通过基因枪介导的dsRNA、siRNA和正义、反义RNA轰击以使GUS抑制蛋白沉默,发现每种方法都能产生siRNA而导致GUS抑制蛋白的沉默,结果使GUS能正常表达。 病毒诱导的基因沉默(virusinducedgenesilencing,VIGS)是通过改造侵染植物的病毒使其携带用于产生RNA沉默的DNA
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