BAC/PAC大型质粒小提试剂盒

基因组DNA文库构建的基本流程

甚至是λ噬菌体载体。利用现有的商品化的黏粒载体、高效率的包装混合物和合适的大肠杆菌菌株，研究者可以方便的构建黏粒载体文库。 如果基因组的目标区域比较大，那么P1、PAC或者BAC就比较合适了。P1操作比较困难，PAC相对简便。BAC载体也是很好的选择，研究者可以利用现有的成熟产品来构建BAC文库，比如EPICENTRE公司的一系列BAC载体及配套试剂盒。 如果目标区域非常大(大于250kb)，那么YAC载体就是首选了。不过，应用YAC载体来构建基因组文库，操作非常繁琐困难

基因组DNA文库构建必备实验技巧

组DNA根据研究目的，研究者需要选择合适的载体。不同的载体对基因组DNA的长度有不同的要求，必须选择合适长度的基因组DNA来构建基因组文库。比如，对于黏粒载体，合适的片段长度大约为40kb；对于BAC载体，合适的片段长度平均为120kb-300kb。构建黏粒基因组DNA文库，需要将基因组DNA用注射器抽打来随机剪切DNA；接着用末端修复酶修复DNA，可以提高DNA连接入载体的效率；然后通过脉冲场电泳或者普通电泳来找到40kb左右的DNA片段，随后使用胶回收试剂盒回收DNA。构建BAC基因组DNA文库，需要

基因组文库构建步骤和操作需知

的大肠杆菌菌株，可以方便的构建黏粒载体文库。 如果基因组的目标区域比较大，那么P1、PAC或者BAC就比较合适了。P1操作比较困难，PAC相对简便。BAC载体也是很好的选择，可以利用现有的成熟产品来构建BAC文库，比如商业化的一系列BAC载体及配套试剂盒。 如果目标区域非常大(大于250kb)，那么YAC载体就是首选了。不过，应用YAC载体来构建基因组文库，操作非常繁琐困难。 表1 各种载体的比较 载体 容量(kb) 宿主 导入细胞方式 黏