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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
ATCC
- 库存:
1
- 细胞类型:
上皮细胞样
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
ATCC
- 相关疾病:
肿瘤研究等
- 物种来源:
ATCC
- 免疫类型:
ATCC
- 细胞形态:
不规则梭形
- 器官来源:
ATCC
- 运输方式:
顺丰快递
- 年限:
理论永生化
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
T25/1*10^6
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我司绝大多数人源细胞系均可提供STR鉴定报告,如下图示例:

细胞收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基,以便进行对比培养)
客户收到细胞也可以向我司索取细胞图,如下为人浆细胞白血病ARH-77细胞图:

人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞图如下:

小鼠皮层神经元原代细胞培养步骤
细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,传代具体步骤如下细胞传代:
A1、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
A2、悬浮细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,将T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中1000rpm
离心5min;
2、弃上清,沉淀细胞加入1ml/支的雅吉生物无血清冻存液(C7001),混匀后加入冻存管中。(如:冻一支,加入 1ml 无血清冻存液即可)
3、将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要将细胞转入液氮罐中,需在-80℃冰箱存
放 24 小时以上。
B1、对于贴壁细胞,传代可参考如下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
B2、贴壁细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
小鼠皮层神经元原代细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
如需细胞培养基,亦可联系我司购买,量大从优:

小鼠皮层神经元原代细胞注意事项:有些细胞比较特殊,如贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
我司细胞库数量众多,欢迎有实力经销商与我司洽谈折扣优惠

欢迎新老客户咨询订购:小鼠皮层神经元原代细胞
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文献和实验神经元之间的环路连接非常复杂,完整而准确地显示这些环路的结构和变化,对揭示许多疾病的病因和新治疗方法的开发具有非常重要的意义。传统的神经示踪方法如电镜、Golgi染色、染料、肽类标记物等可以显示神经元的形态和投射,少数示踪剂如WGA、TTC等还可以实现跨突触标记,但这些方法都具有信号间接、方向不特异、跨突触后信号衰减严重等缺点,最重要的是,这些染料无法携带基因,因此只能显色。自20世纪80年代,Kristensson首次应用单纯疱疹病毒(HSV)跨突触标记神经元后,各种各样病毒载体在环路示踪
称为原代细胞培养,适合用腺病毒感染。由于细胞增长缓慢,病毒感染效率较低,因此需要进行 MOI 梯度摸索实验,选择适合的 MOI 进行实验,从而提高病毒感染效率(MOI 摸索实验参考第一部分第四小节)。 原代细胞培养和感染注意事项: 1、由于原代细胞增长缓慢,使用腺病毒感染,可以在接种时提高汇合度到 50-60% 左右,确保在感染后 2 天时细胞汇合度达到 90~100%。感染非分裂细胞如神经元细胞,接种后不再增殖,可按照 100% 的汇合度进行接种。 2、若使用慢病毒感染原代细胞,建议接种时细胞
in melanocyte dysfunctional disease.蛋白分析技术浅析酸敏感离子通道1a(ASIC1a)是神经系统中的关键质子受体,介导了一些酸中毒引起的神经元损伤。研究发现ASIC1a蛋白也存在于线粒体小鼠皮层神经元且与腺嘌呤核苷酸转位酶相关。ASIC1a(-/-)小鼠的纯化的线粒体表现出明显增加的Ca2 +保留能力和吸收率。与过氧化氢(H2O2)竞争时,ASIC1a(-/-)神经元表现出抗细胞色素c释放和线粒体膜去极化,说明ASIC1a缺失可能影响线粒体通透性转换(MPT)。在ASIC1a
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