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基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备

MALDI-TOF-MS最初用于等分试样（1μL或更少）样品的质谱鉴定，用于检查肽的纯度或PMF。大批量的样品测定，往往使用Edman降解法测序或ESI-MS，如四极（Q）-TOF-MS 质谱。做出以上选择的原因，主要是因为MALDI技术进行分析，上样量不能超过0.5μL。这种样品制备方法极大地限制了MALDI技术检测的整体灵敏度，并且还限制了可以分析的肽浓度，因为肽和基质共结晶过程的质量对于检测的灵敏度和准确性都非常重要。MALDI技术通常将等体积的样品和MALDI基质溶液混合，将肽混合物

幽门螺杆菌IgG抗体胶体金免疫层析快速诊断试纸条的研制

免疫胶体金用10%～30%蔗糖或甘油溶液做密度梯度离心或用凝胶过滤法进一步纯化。胶体金免疫层析试纸条的研制不仅在抗原抗体的选择、用量优化、层析材料的选择、胶体金的制备与标记等方面至关重要，而且缓冲系统的优化尤其是各种辅助添加剂的选择，优化组合也必不可少。为确保试剂盒的稳定性，试纸条的组装须在洁净干燥的环境下进行，空气湿度＜20%为宜。本试验制备的检测H.pylori IgG抗体的胶体金免疫层析试纸条经临床血清标本检测，初步结果与国产ELISA试剂盒比较差异无显著性，说明两种方法在特异性、敏感

一个正在崛起的新学科——蛋白质组学

的。样品分级不仅可以提高低丰度蛋白的上样量和检测率，还可以针对某一细胞器的蛋白质组进行研究。对临床组织样本进行研究，寻找疾病标记，是蛋白质组研究的重要方向之一。但临床样本都是各种细胞或组织混杂而且状态不一的，如肿瘤组织中发生癌变的往往是上皮类细胞，而这类细胞在肿瘤中总是与血管、基质细胞等混杂。所以，常规采用的癌和癌旁组织或肿瘤与正常组织进行差异比较，实际上是多种细胞甚至组织蛋白质组混合物的比较。最近，在组织水平上的蛋白质组样品制备方面已有新的进展，如采用激光捕获显微切割（laser capture