2×Taq MasterMix(含染料)

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      2×Taq MasterMix(With Dye)

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃,避免反复冻融

    • 规格

      1ml|5ml|25ml

    特别提示:包括2×Taq MasterMix(含染料)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:2×Taq MasterMix(含染料)
    英文名称:2×Taq MasterMix(With Dye)
    产品货号:WE0102
    产品规格:1ml|5ml|25ml

      Taq MasterMix是由Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。预配好的PCR混合液可根据使用量的多少调节扩增产物的特异性和得率,使操作更加简单快捷,并可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使扩增产物得率高,重复性强,稳定性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。

    产品组成
    组份 1ml 5ml 25ml
    2×Taq MasterMix(With Dye) 1ml 5×1ml 5×5ml
    ddH2O 1ml 5×1ml 5×5ml

    注意:2×Taq MasterMix含有Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

    质量控制
    1、经检验无外源核酸酶活性;
    2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系:
     
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    2×Taq MasterMix(With Dye) 25μl
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件:
     
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 94℃ 2 min  
    变性 94℃ 30 s 25-35 个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 30 s
    终延伸 72℃ 2 min  


    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


    储存条件:-20℃,避免反复冻融。

    我公司销售的2×Taq MasterMix(含染料),质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。

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