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HPV假病毒

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  • ¥18800
  • yaji
  • 上海
  • 80022
  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      上海雅吉生物科技有限公司

    HPV假病毒说明书

    【产品名称】
    通用名称:HPV假病毒 
    【包装规格】
    15/30/50/100μl/
    【预期用途】
    用于HPV抗血清或者单抗中和抗体滴度体外检测。
    【检验原理】
    中和抗体在体外与假病毒中和,使得假病毒丧失感染细胞的能力,进入细胞的假病毒会表达EGFP等蛋白,通过Elispot读板仪扫描并计数每孔荧光斑点数,通过与假病毒对照组荧光斑点数比较,计算其抑制百分比,通过计算公式可以计算出当假病毒50%被抑制时抗体的稀释倍数,来计算其ID50,ID50来表示抗体对假病毒中和活性大小。
    主要组成成分
    HPV假病毒颗粒,L1L2蛋白以及报告基因,自折叠成HPV假病毒颗粒
    储存条件及有效期
    -80℃ 密封贮存。有效期:长期。
    避免反复冻融。
    生产日期及有效期详见标签。
    【样本要求】
    样本为HPV假病毒,可在体内复制一轮,操作时需在无菌条件下操作。
    检验方法
    1 预先4-8小时铺293FT细胞于96孔板,每孔细胞数为1.5×104 ,置于37℃、 5% CO2孵箱中培养。
    2 加样顺序
    2.1 40倍初始稀释:取96U型板,于B4- B11孔中各加入152μl DMEM完全培养基,其余各孔中加入120μl DMEM完全培养基。于B4- B11孔中加入血清样品8μl/孔,每样品两复孔。
    2.2 10倍初始稀释:取96U型板,于B4- B11孔中各加入128μl DMEM完全培养基,其余各孔中加入120μl DMEM完全培养基。于B4- B11孔中加入血清样品32μl/孔,每样品两复孔。
    加样顺序表
            样品1 样品2 样品3 样品4  
      1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
    A                
    B   细胞对照(培养基) 病毒对照(假病毒+培养基)          
    C            
    D            
    E            
    F            
    G            
    H                
    3样品稀释:将多道电动移液器调至40μl移液和100μl混匀程序,对B4- B11孔中液体轻柔的反复吹吸8次充分混匀,然后转移40μl液体至对应的C4- C11孔,轻柔的反复吹吸8次后转移至D4-D11孔,以此类推,最后从G4-G11孔中吸弃40μl液体。
    5.2.4 DMEM完全培养基将假病毒稀释至200TCID50,于第B3-G11孔,每孔加120μl
    5.2.5将稀释板4 放至1小时。
    5.2.6 从稀释板各孔中吸取100μl的假病毒血清混合物(或培养基)贴壁缓缓加入预先已铺好细胞的培养板对应孔中,轻拍培养板四周混匀。  
    5.2.7 将细胞培养板置于375% CO2的孵箱中培养60-96小时。
    5.2.8 ELISPOT读板仪进行检测,计算感染抑制率(%=1-(样本检测值-细胞对照值)/(病毒对照值-细胞对照值)×100%
    5.2.9 计算ID50
    【阳性判断值】
    中和实验过程中需要设置阴性对照,阳性对照,作为参照,来判断实验是否成立,阴性对照ID50小于30,阳性ID50大于30作为判断值
    【产品性能指标】
    1. 外观
    外观应满足如下要求:
    1.1包装完整,无破损;外观应整洁,文字符号标识清晰;
    【注意事项】
    1. 本产品仅供中和抗体体外检测。
    2. 减少反复冻融
    3. 流水或者4融化使用。
    4. 无菌操作。
    5. 本产品不能重复使用。

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