羧甲基纤维素钠CMC(粘度800-1200)

MTT测定CMC

1． Fen细胞培养于含10％小牛血清的RPMI-1640培养液中，在25cm2培养瓶中生长到接近汇合。用含0.05％胰蛋白酶，0.02％ EDTA的PBS消化细胞5分钟，洗涤后，用 细胞培养 液将细胞配成1×105/ml。 2． 取96孔 细胞培养 板，每孔加0.1ml细胞悬液，在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培 养箱中培养24小时，让细胞帖壁。每孔加0.1ml效应细胞悬液，效靶比10

单细胞CMC试验

1．用细胞培养液等量混合效应细胞和靶细胞，30℃水浴10分钟。室温中250×g离心5分钟，去上清液。同量靶细胞不加效应细胞同样处理作为对照。 2．用少量细胞培养液轻轻悬浮细胞，吸管上下吹打5～6次。这一分散细胞的步骤关系到试验的准确性和重复性，应当设法保持技术的一致性。取少许细胞悬液，稀释后直接在显微镜下计数效应细胞和靶细胞的结合率，即平均每100各淋巴细胞中结合了靶细胞的效应细胞的数目。 3．其余的细胞悬液与等量液态（37℃）的0.5％低熔点琼脂糖混合均匀，铺在培养皿中，厚度≤

荧光检测CMC

1． 用含 10 ％小牛血清和抗生素的 RPMI-1640 培养液将 K562 细胞配成 1 × 105 /ml 浓度。用同样培养液将 PBMC 配成 1 × 106 /ml 浓度。 2． 取 96 孔圆底细胞培养板，每孔加 0.1ml K562 细胞悬液；每孔加适量 PBMC 使效靶比为 1 ： 1 ～ 5 ： 1 ，每种处理 3 个复孔； 3 个对照孔只加效应细胞； 8 个对照孔只加靶细胞； 4 个对照孔只加细胞培养液。每孔加 20 μ l Alamar Blue