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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
480
- 英文名:
Zero Background TOPO TA Cloning Kit(with MCS)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
20次|80次
特别提示:包括TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
英文名称:Zero Background TOPO TA Cloning Kit(with MCS)
产品货号:ALH329
产品规格:20次|80次
本试剂盒采用了拓扑异构酶可以在瞬间(几秒钟-几分钟)、高效(接近100%)连接DNA片段的原理,这与和传统的T4连接酶原理不同。
试剂盒组份(20次):
TOPO-Ta Vector(30ng/μl)—————20μl
1000bp Control(30ng/μl)————5μl
10×Enhancer———————————20μl
产品特点:
1. 可以在瞬间(几秒钟-几分钟)完成连接。
2. 无需冰浴和热休克,室温5分钟内完成转化;无需1小时复苏,只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景,无需繁琐蓝白斑筛选,见到长出的克隆便是有插入的(接近100%)。
4. 可以连接长达10kb片段(即使连接5kb片段,挑10个菌落,至少8个是有插入的),是目前世界上zuì简单、zuì快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
本制品别名:TA载体连接试剂盒
除了TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术),TA载体连接试剂盒,我公司还供应以下相关产品:
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文献和实验按克隆的连接体系将这个小片段与你的载体(相应酶双切)连接转化…… 小片段连入的效率相当高,如果大家要检验:在菌长出来后,做PCR检验(人工合成的这个小片段的正链或反链与载体上的引物)。举个例子: 比如要在某载体的EcoR I和BamH I之间加一个新的MCS(EcoR V-Kpn I-Xho I-Hind III)(这几个位点必须在目的 载体上没有,如果有这个切点,你又实在想用的话,可以将目的载体用这个酶单切,绿豆芽核酸 酶/s1核酸酶平端化,再自连——位点封闭): 1、合成 5‘-
原理】 1.DNA片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,在连接酶作用下,可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点,可用于PCR产物的克隆和测序。
;2、转化子少,虽然阳性率高,但是转化子少;3、稳定性比较差,拓扑异构酶对温度很敏感,运输的温度和连接的温度都会影响,用水浴锅控制连接温度因为温度误差比较大就很难连接,必须用PCR仪;4、经常会测序无信号,从测序公司的反馈,这种载体经常会导致T7启动子丢失,测序无信号,必须换引物才能测序。这两种方法各有优缺点,有没有一种T载体能够兼备两种方法的优点,而克服两种方法的缺点呢?一直致力于生物技术原创技术开发的百泰克公司新近推出的PUM-T载体兼具两种方法的优点,不仅提高了连接效率和阳性率,而且连接时间仅仅
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