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420
- 英文名:
Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×, Stock Solution)
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2ml
特别提示:包括磷酸酶抑制剂混合物(100×,储存液)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磷酸酶抑制剂混合物(100×,储存液)
英文名称:Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×, Stock Solution)
产品货号:SY0310
产品规格:2ml
细胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡等许多重要的生物学活动的调控开关。因此在蛋白研究过程中,对磷酸酶作用的控制具有重要的生理意义。组织和细胞中充斥着大量的酶原,经裂解后释放到体外的酶原被充分激活从而开始消化周围的蛋白。因此,在研究蛋白*酸化途径和信号通路的过程中保护蛋白*酸化状态是极其关键的。
本品是多种磷酸酶抑制剂的特殊混合物,广谱抑制非特异性的酸性/碱性磷酸酶以及特异性的蛋白酪氨酸磷酸酶,丝氨酸/苏氨酸蛋白*酸酶(PPA,PP2A)等。
本品以A、B管的形式提供,2种溶液可以靶向不同的磷酸酶类型,起到协同抑制的作用。本品可用于WB, Co-IP, Pull-down assay, IF, IHC, 激酶研究等多种分析。
产品组份:
A液(100×):1mL
B液(100×):1mL
使用方法
本品使用前从冰箱取出回温至室温。按照1:100(v/v)的比例向样品中分别加入A液,B液,每次加入后需充分混匀。
① B液溶剂为DMSO,完全溶解较A液需要较长时间,温度较低时,可将其置于25℃水浴溶解。
② 使用前将A、B液混合容易形成沉淀,建议向样品中分别加入适量A液和B液;
③ 本品可耐受1%的SDS, Triton, NP-40。
储存条件:-20℃,有效期1年。
注意事项
1)100×存储液建议分装冻存,避免反复冻融。工作液需现配现用。
2)本品不含蛋白酶抑制剂,可根据实验需要,向待分析样品预先加入合适的蛋白酶抑制剂。
3)B液溶剂为DMSO,请务必小心操作。
4)DTT, EDTA, EGTA等可能会影响本品中含有的正钒酸钠,请小心操作。
5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套进行操作。
除了磷酸酶抑制剂混合物(100×,储存液),,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN130525 | 蛋白*酸酶抑制剂混合液Ⅱ | 1mL |
| YT048 | SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒 | 可制30-50块胶 |
| YT052 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) | 2ml |
| SNM404 | 1.5 M×Tris Buffer缓冲液(pH8.8) | 500ml |
| SNM498 | 4%多聚jiǎ醛(含DEPC) | 500ml |
| RFT041 | 蛋白Marker(66KD) | 50mg |
| RFT067 | 40%丙稀酰胺溶液(19:1) | 100ml |
| SY0307 | 十二烷基硫酸钠(分子生物学级) | 500g |
| SY0436 | 人β-淀粉样多肽 1-42 | 1mg |
| SY0456 | 牛血清白蛋白(低内毒素) | 25g |
| QN1075 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 500微孔(50T)|500微孔(50T)*10 |
| HR0077 | 白细胞蛋白提取试剂盒 | 50T/100T |
| HR0091 | 细菌膜蛋白提取试剂盒 | 50T/100T |
| HR0287 | 蛋白酶抑制剂混合物 | 250μl/1ml |
| HR0298 | 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物(含EDTA) | 250μl/1ml |
| GL1492 | 双缩脲试剂(AB液) | 100ml|500ml |
| GL1566 | 苯*黑染色液(0.55%) | 100ml |
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文献和实验最近很多人问毛老师关于磷酸化的问题。比如:要检测的蛋白有磷酸化的,要加磷酸酶抑制剂吗?在做 erk1/2 磷酸化表达实验,提取总蛋白的时候需要加入磷酸酶抑制剂,什么抑制剂比较好?答案是:当然必须一定要加啊!毛老师来给大家简单解释一下。许多生物学过程和通路的调节都伴随着磷酸酯的形成和去除。而蛋白的磷酸化状态的平衡是由蛋白激酶和磷酸酶相互影响达到的。其中一个重要的步骤就是准确的观察一般和特异的磷酸化状态。在细胞裂解的过程中溶酶体释放大量蛋白酶对磷酸化蛋白会产生极大影响,所以需要磷酸酶抑制剂对磷酸
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意:在准备做磷酸(酯)酶实验的时候,不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe: 1.称取 790 mg 的 Tris-Base,加到 75 ml 去离子水中,加入 900 mg 的 NaCl,搅拌
) 胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)(用甲醇配制成1mg/ml的储存液,分装,-20℃保存) RIPA磷酸(酯)酶抑制剂 激活的Na3VO4(用H2O配制成200mM的储存液,见Sodium Orthovanadate Activation Protoco) NaF(200mM的储存液,室温保存) 注意:在准备做磷酸(酯)酶实验的时候,不加磷酸酯酶抑制剂 工作液配制: 配制100ml的modified RIPA buffe: 1. 称取790mg
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