2×Fast Pfu PCR MasterMix

特别提示：包括2×Fast Pfu PCR MasterMix在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：2×Fast Pfu PCR MasterMix
产品货号：JN0043
产品规格：1ml

  本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu酶、dNTP、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂，预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu PCR MasterMix专为扩增克隆DNA片段优化，高保真，错误率仅为1.3x10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便。较普通Pfu酶，2×Fast Pfu PCR MasterMix具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。
本制品用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。

产品特点：
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段
快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。
便利：10μl,25μl或50μl体系全部适用。

使用建议：
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3′端"A"突出，其PCR产物的克隆有两种方案：
1、PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2、将产物3′末端加A后再与T载体连接。
由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30bp 碱基。另外为了减少由3′- 5′外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系。

常用反应体系(50μl)：

组分	体积
2×PCR MasterMix*	25μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环：

当扩增片段＜3K：
94℃	1分钟30秒
30次循环	94℃,30秒 57℃,30秒 72℃ 根据产物长度调整, 30秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温
当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：
94℃	1分钟30秒
30次循环	94℃,5秒 68℃ 根据产物长度调整,30秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

PCR MasterMix选购指南：

编号	产品名称	特点
适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列
JN0030	2×Taq PCR MasterMix	高性价比PCR Mix，使用简便，扩增灵敏度高
JN0034	2×Complex Taq PCR MasterMix	JN0030改进版，性能更均衡，适用面更广
JN0040	2×Fast Taq PCR MasterMix	zuì快速的PCR试剂，常规PCR鉴定45分钟内知道结果
JN0035	2×RoomTop Taq PCR MasterMix	可放在手边的PCR试剂，室温稳定存放60天
JN0036	2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix	室温稳定存放60天，高速PCR试剂，常规PCR鉴定45分钟内知道结果
适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆
JN0032	2×Taq Plus PCR MasterMix	扩增效率更高及较好的保真度
JN0038	2×Hot Start Taq PCR MasterMix	采用热启动Taq，可获得很好的特异性
JN0041	2×Ultra Taq PCR MasterMix	高速扩增酶，优化配方，解决PCR扩增难题的，灵敏度高
高保真酶试剂，适用于长片段基因克隆
JN0031	2×Pfu PCR MasterMix	采用高保真酶，适用于基因克隆
JN0043	2×Fast Pfu PCR MasterMix	采用改良型高保真酶，更好的扩增效果，4倍扩增速度；扩增迅速
防止PCR产物二次污染、极高检测灵敏度的PCR试剂
JN0047	2×PCR MasterMix(防污染)	采用dUTP/UDG酶系统，从根本上杜绝PCR产物二次污染
JN0033	2×Genotyping PCR Kit（nomal）	极高检测灵敏度，可达到普通PCR试剂102至104倍扩增灵敏度

PCR MasterMix性能对比表：

名称	编号	扩增时间	扩增长度	是否有3"-A	基因组扩增
2×Taq PCR MasterMix	JN0030	1min/kb	≤8kb	√	+
2×RoomTop Taq PCR MasterMix	JN0035	1min/kb	≤8kb	√	++
2×Complex Taq PCR MasterMix	JN0034	1min/kb	≤8kb	√	+
2×Fast Taq PCR MasterMix	JN0040	15s/kb	≤8kb	√	+
2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix	JN0036	15s/kb	≤8kb	√	++
2×Ultra Taq PCR MasterMix	JN0041	15s/kb	≤8kb	√	+++
2×Taq Plus PCR MasterMix	JN0032	1min/kb	≤20kb	√	++++
2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix	JN0042	15s/kb	≤30kb	√	++++
2×Hot Start Taq PCR MasterMix	JN0038	1min/kb	≤8kb	√	++++
2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMix	JN0039	1min/kb	≤20kb	√	++++
2×Pfu PCR MasterMix	JN0031	1min/kb	≤6kb	×	+
2×Fast Pfu PCR MasterMix	JN0043	30min/kb	≤12kb	×	+
2×SYBR Green Realtime PCR MasterMix	JN0049	1min/kb	≤8kb	√	++
2×Genotyping PCR Kit（Normal）	JN0033	1min/kb	≤8kb	√	+++++
2×Genotyping PCR Kit（Fast）	JN0044	15s/kb	≤8kb	√	+++++
2×PCR MasterMix(防污染)	JN0047	1min/kb	≤8kb	√	+

除了2×Fast Pfu PCR MasterMix,，我公司还供应以下相关产品：


BTN131178 DNA Shuffling试剂盒 10次
YT378 2×PCR Master Mix（含Taq酶，buffer，dNTP） 400次
YT388 dTTP溶液(100mM) 250μl
YT398 cDNA第二链合成试剂盒 10次
WE0103 Bes Taq DNA Polymerase 500U|2500U
WE0126 防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶) 1ml
WE0140 实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ) 5ml
ALH197 一步法荧光定量耐热RT-PCR试剂盒 50μl×50次|50μl×100次
RFT105 Oligo(dT)18 Primer 100μl
SY0040 PCR增强剂 1ml
QN0951 通用RT-PCR试剂盒(M-MLV) 25T|50T|100T
HQF13 转基因食品直接PCR试剂盒 100次/500次
WH0074 2×Pfu PCR预混反应液 1ml（不含染料)|5×1ml（不含染料)|1ml（含蓝色染料)|5×1ml（含蓝色染料)