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TaqMan探针法基因分型

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      TaqMan探针法基因分型

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      北京百奥创新科技有限公司

    TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。 探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时,5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。 PCR扩增时,加入一对特异引物的同时,加入一对特异性的荧光探针,该探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。当溶液中存在DNA目的片段时,荧光探针与模板退火结合,随着PCR的进行,热启动Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的,游离的单链探针不受影响)就会切割探针,释放5′-端报告基团游离于反应体系中,远离3′-端荧光淬灭基团的屏蔽,破坏两荧光分子基团间的能量转移(FRET),因此5′-端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号累积与PCR产物形成的同步,荧光信号的强度能够代表模板DNA的拷贝数。 
    服务内容:
    1、基因和SNP序列信息分析。
    2、实验方案讨论与确定。
    3、引物和探针的设计优化。
    4、引物和探针的合成。
    5、qPCR实验。
    6、数据分析整理。
    7、报告生成。

    服务流程:
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