pNubG-Fe65膜蛋白双杂交质粒

基本信息

启动子:	ADH1 promoter
质粒分类:	酵母细胞质粒；酵母杂交质粒；双杂交类质粒
质粒大小:	8579bp
原核抗性:	氨苄青霉素Amp
筛选标记:	TRP1
克隆菌株:	DH5α等大肠杆菌
培养条件:	37℃，有氧，LB
备注:	Positive control pre

质粒简介

            Coexpression of Cub-fused APP and NubG-fused Fe65 from pTSU2-APP and pNubG-Fe65 should lead to robust growth on selective medium as APP and Fe65 interact with each other and consequently initiate the split-ubiquitin mechanism.

质粒图谱

pNubG-Fe65膜蛋白双杂交质粒使用说明：
    
     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
     3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
     4、42℃热激90s，再冰浴2min；
     5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
     6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
     8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
 
pNubG-Fe65膜蛋白双杂交质粒注意事项：
 
      1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
      2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。