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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
基本信息
| 质粒分类: | 哺乳细胞载体;蛋白过表达质粒 |
|---|
质粒图谱
pCMV-3×FLAG-MCS-Myc哺乳表达质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pCMV-3×FLAG-MCS-Myc哺乳表达质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费?
个和12,000个,其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供:一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签,一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上,可方便转换至其他目的载体。 按照其网页上的促销价:900RMB/clone × 100 = 9万RMB, 直接买,不用等时间,就可搞定,批量买估计还可以讲价,关键的是品质有保证。 注:非公司托儿,因前段时间帮朋友筹划项目专门研究
的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisC 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA4/HisB 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA3 flag 含flag标签的真核表达载体 amp/neo pIRES 一个真核双表达载体,外源序列只要是带有起始密码子和终止密码子就可以进行表达了,载体提供了转录装置PCMV和polyA。载体本身没有阅读框,只有转录起始位点,翻译的起始就由插入序列自己完成了。MCSB的共翻译
3.1(-)-Flag 哺乳细胞质粒 Amp pCDNA3.1-3HA 哺乳细胞质粒 Amp pCDNA3.1(+)/myc-His 哺乳细胞质粒 Amp pCDNA3.1(+)myc-His B
技术资料暂无技术资料 索取技术资料




