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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
2UG/5UG
| 规格: | 2UG | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5UG | 产品价格: | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | NM_145740.5;GST-epsilon; GST2; GSTA1 |
|---|---|
| 启动子: | 无 |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | 无 |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | LB/37℃ |
| 5'测序引物: | M13R |
| 3'测序引物: | M13F |
质粒图谱
pCR4-TOPO-CNTNAP2(2个同义突变)人源基因模板质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pCR4-TOPO-CNTNAP2(2个同义突变)人源基因模板质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验地通过在任何PCR产物上连接BLOCK-iT™ T7-TOPO? 接头(BLOCK-iT™ T7-TOPO® linkers)产生正义和反义的转录本。 · 获得合成、纯化和退火RNA转录本所需要的一切,直接用来在无脊椎动物和一些哺乳动物胚胎细胞中进行RNAi分析。 · 与BLOCK-iT™ Dicer RNAi Transfection Kit合并使用时,可以重复获得高纯度的d-siRNA库。 图5 BLOCK-iT® 合成的转录本在昆虫S2细胞产生清晰的结果 为了显示内源基因功能的抑制,使用胞质
,近年来人们较多采用此方法克隆基因启动子。苏宁等根据已报道的水稻叶绿体16SrRNA启动子基因序列设计5'启动子序列的引物,以水稻叶绿体DNA为模板,PCR扩增出16SrRNA基因5'启动子区的片段,酶切克隆到pSK的SacI和SphI位点,构建测序载体质粒pZ16S,进行序列测定,结果表明所克隆的片段长为144bp,含有SD序列。同源比较结果表明,所克隆的片段与水稻叶绿体16SrRNA启动子序列具有100%的同源性。上述的PCR方法简便、快捷、操作简单,是人们较为广泛使用的技术。1.3 环状PCR
子,由于PCR法简便快捷,近年来人们较多采用此方法克隆基因启动子。 苏宁等根据已报道的水稻叶绿体16SrRNA启动子基因序列设计5'启动子序列的引物,以水稻叶绿体DNA为模板,PCR扩增出16SrRNA基因5'启动子区的片段,酶切克隆到pSK的SacI和SphI位点,构建测序载体质粒pZ16S,进行序列测定,结果表明所克隆的片段长为144bp,含有SD序列。同源比较结果表明,所克隆的片段与水稻叶绿体16SrRNA启动子序列具有100%的同源性。 上述的PCR方法简便、快捷、操作简单,是人们较为广泛使用的技术
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