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细胞介绍
人视网膜muller细胞是视网膜中主要的胶质成分,来源于前体细胞。视网膜muller细胞负责维持视网膜的胞外环境的稳态,并参与血管发生的控制和视网膜血流的调控。
细胞特性
1)来源:新鲜正常人眼球
2)含量:>5x105 个/mL
3)鉴定:Vimentin特异性抗体免疫荧光法
4)纯度:>90%
5)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
6)规格:1mL冻存管包装
运输和保存:干冰运输,收到后立即液氮冻存。
细胞使用:仅供科研使用。
细胞培养方法
1)完全培养基:RPMI-1640培养基(GIBCO),90%;胎牛血清,10%;P/S,1%。
2)培养方式:贴壁培养
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文献和实验视网膜母细胞瘤是起源于视网膜的胚胎性的眼内恶性肿瘤。本病与遗传、染色体畸变、病毒感染有关。患者90%为3岁以内婴儿,少数发生于大龄儿童,偶见成人。无种族及性别差异。多单眼发病,约占70%,双眼同时或先后发病者约为30%。双眼发病者全部及单侧患者中的10—15%多具有遗传性,属常染色体显性遗传,外显率不全,故表面正常,带有致病基因的父母不一定发病,但可以有患病的子女。在我国有家族史者占2.5%—3.5%。染色体研究也证明部分患者有染色体的异常,发现13号染色体长臂缺失或基因
吸出培养瓶中的培养基,用PBS液洗涤1-2次; 加入已经在37度预热的消化液(0。25%胰酶+0。02%EDTA)少量(估计可以平铺培养瓶底部即可); 在镜下看到细胞退缩变园,立即给予少量培养基终止消化,我一般的消化时间就在1分钟之内很好消化; 再用弯管吹打细胞成单细胞悬液后,按1:2或1:3分瓶即可。
,并用眼科小剪子剪去视乳头周围的视网膜及血管; ③ 用PBS液稍洗,去除黏附的色素上皮细胞。置于盛有平衡盐溶液的培养皿中; 2. 取自兔的供体眼球:当取出视网膜组织后,在解剖显微镜下用眼科小剪刀剪去髓放线部分及血管。 二、原代培养 1. 在处理完毕的视网膜组织中加入胰蛋白酶和透明质酸酶混合消化液,于37℃调间隙消化30min; 2. 用有血清培养液终止消化。经吹打后,将细胞悬液离心(800r/min)5min; 3. 用培养液重新悬浮细胞,并吸走絮状的纤维样物质
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