ATP/ADP检测

ADP/ATP比率的变化已被用于区分细胞死亡和存活的模式。ATP水平升高和ADP水平降低表示细胞增殖。相反，ATP水平的降低和ADP水平的增加导致细胞凋亡或坏死，其中ATP的减少和ADP的增加在坏死中比在细胞凋亡中更明显。

 

检测方法

可以在试管或96孔板中进行测试。为了保持一致性，建议所有样品的三次发光测量之间的时间相同。

1.样品制备。对于悬浮细胞，将10μL培养的细胞（10³-10'）转移到白色不透明的96孔板中。
粘附细胞：在白色不透明微孔板中培养10³-104个细胞。在测定时，在加入90μL ATP试剂之前立即除去培养基（见下文）。

2.ATP测定。将测定缓冲液、底物和共底物置于室温。在冰上或4℃下解冻酶。建议进行FreshReconstitution。将未使用的试剂（包括酶）储存在20°C下。
ATP试剂。对于每个96孔，将95μL测定缓冲液与1μL底物、1μL共底物和1μL ATP酶混合。向每个孔中添加90μL ATP试剂，并通过轻敲平板进行混合。1分钟后，读取铝量计上的发光（RLU A）。

3.ADP测定。制备ADP试剂：对于每个96孔，混合5μL dH₂O与1μL ADP酶作用。
在读取ATP（RLU A）的发光后10分钟，再次读取样品（RLU B）的发光。该测量在测量ADP（即残余ATP信号）之前提供背景。
读取RLU B后，立即向每个孔中添加5μL ADP试剂，并通过轻敲板或上下移液进行混合。1分钟后，在光度计上读取发光（RLU C）。

4.ADP/ATP比值的计算。从RLU C中减去RLU B，然后除以RLU A：RLUC-RLUB ADP/ATP比率=RLU A

 

结果展示

 

晶莱生物服务流程

收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容，或来电咨询！

做实验，找晶莱！您的科研生涯，我们一路相伴！
【平台项目开展范围】慢病毒，腺病毒，RNAi类，分子生物实验，病理实验，免疫学实验，细胞实验，动物实验，蛋白组学实验，芯片类实验，并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导等服务。

【北京公司】北京经济技术开发区科创十三街12号院德为科技园1号楼5层
【长沙公司】长沙市高新区麓谷大道627号新长海中心A1-1203室

【晶莱生物】已开展了数千个实验外包项目。我们专注于医学课题研究，已从课题申请、方案设计、试剂采购、模型构造、标本检测、数据分析，各个环节积累了数千个成功案例经验，为数千个来自临床的科研工作者解决了大量的科研问题。更多相关实验服务信息请咨询晶莱生物