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- FS-10-11392
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型：
IgG
- 保存条件：
Store at -20 °C
- 库存：
20-60
- 供应商：
上海邦景
- 浓度：
1mg/ml
- 抗体英文名：
PI14
- 规格：
0.2ml
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文献和实验获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解 30 min，细胞裂解液于 4 ℃，最大转速离心 30 min 后取上清； 取少量裂解液以备 Western blot 分析，剩余裂解液加 1 μg 相应的抗体加入到细胞裂解液，4 ℃ 缓慢摇晃孵育过夜； 取 10 μl protein A 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗 3 次，每次 3 000 rpm，离心 3 min； 将预处理过的 10 μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中 4 ℃ 缓慢摇晃孵育
核蛋白提取 实验准备： 1 4℃离心机 2 根据标本数计算所需I，II，III，IV总体积，取出液体，并加入蛋白酶抑制剂，（III由加蛋白酶抑制剂I与加蛋白酶抑制剂II混合物） 实验操作： 1 收集细胞。10ml 对照细胞（1-2*105/ml ）培养48h后，15ml 离心管收集，300g（1370 rpm）* 5min。弃上清，加1ml 1*PBS轻轻涡旋混匀后转移至1.5ml EP管。 2 4℃，300g * 5min，弃上清。 3 重悬
time PCR 之前都要把 sample 离心保证取样的准确。 11、1~10ul 的*取 3ul 以上才比较准确，所以考虑好自己 PCR 反应体系的配置。 12、一个 ChIP 一般需要 3~4 天的时间，其中有几个步骤是可以停下来的： 1）细胞收集：用含蛋白酶抑制剂的 PBS 洗涤离心，去上清的细胞收集液可置 -80° 冻存； 2）用 SDS 重悬细胞后可置 -80° 冻存； 3）sonication 结束，离心后的上清置新的离心管后可 -80° 冻存； 4）reverse cross
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