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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
28
- 英文名：
X-Gal 干粉
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.5g
服务流程：
1）X-Gal 干粉0.5g规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. X-Gal 干粉0.5g规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. X-Gal 干粉0.5g规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )10L JM110 感受态细胞10×100μL
Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )50L JM109 化学感受态细胞0.1mL×10
Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )10L JC-11mg
Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )50L JC-105mg
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 高 pH)30 次 IPTG 溶液，200mg/mL1.5mL
电泳级丙溶液 ( 干粉型 )200mL 冷冻型血液 RNA 保存液100mL
电泳级甲叉双丙 25g 酪蛋白50g
电泳级 TEMED1.5mL 昆虫种属鉴定 PCR Mix100 次
电泳级过0.1gx10 昆虫细胞裂解液50mL
电泳级尿素100g 口腔角质细胞生长因子5mL
抗凝血酶Ⅲ，10mg/mL1mL OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞0.1 mL×10
APMSF 溶液，10mg/mL1mL Oligo(dT) 再生溶液100mL
胰蛋白酶抑制剂，10mg/mL10mL Oligo(dT) 纤维素25mg
抑氨肽酶，5mg/mL5mL Oligo 快速复性液，10×1mL
钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液，10mg/mL10mL Oligo dT12-18 引物，0.5μg/μL5μg
产黄青霉 多主枝孢（蜡叶芽枝霉）
苏云金芽胞杆菌熊本亚种Bacillusthuringiensissubsp.kumamotoensis 小红酵母
胰酪胨大豆琼脂培养基200ml/瓶 脱硫弧菌脱硫亚种(脱硫微螺菌、脱硫螺菌、脱硫杆菌、脱硫芽孢弧菌、脱硫弧菌)
蜜粘褶菌=革裥菌 枯草芽孢杆菌黑色变种AS1.433冻干粉
多头霉 许旺酵母变种
肺形侧耳、柳树菌、树窝 丁香假单胞菌
大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种 白色噬琼胶菌
宛氏拟青霉 木醋杆菌
膜醭毕赤酵母 肺炎克雷伯菌ATCC700603冻干粉
厌氧消化链球菌 霉
X-Gal 干粉0.5g规格华美链霉菌 短短芽胞杆菌 Brevibacillus brevis
大肠埃希菌冻干粉 多粘类芽胞杆菌 Paenibacillus polymyxa
甲型副伤寒沙门氏菌 假单孢菌 Pseudomonas sp.
拜氏梭菌 苏云金芽胞杆菌莫里逊亚种 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni
紫云英根瘤菌 云芝
实验步骤：
(1) X-Gal 干粉0.5g规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验, transfect the DNA into mammalian cells, and then fix and stain a tissue with X-gal. The cells that turn blue must have the beta galactosidase enzyme, the product of the lac Z gene, which could only have been expressed from the donated promoter. Ergo
Materials Fixative 2% Paraformaldehyde (in PBS) Staining solution 5 mM potassium ferricyanide, 5 mM potassium ferrocyanide, 2 mM MgCI, 0.01% sodium deoxycholate 0.02% Nonidet P-40 (NP-40) in PBS. X-gal Stock 40 mg
Detection of -Galactosidase Activity: X-gal Staining
X-gal staining is a rapid and convenient histochemical technique used to detect reporter gene expression. A prerequisite is the creation or acquisition of transgenic reporter mouse lines, in which the bacterial LacZ gene has been knocked
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