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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
Rosetta 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10×100μL
Rosetta 感受态细胞10×100μL说明书详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是Rosetta 感受态细胞10×100μL说明书的相关产品：
Nutlin-3(MDM2 拮抗剂 )1mg Actin-Tracker Green( 微丝绿色荧光探针 )0.2mL
Okadaic acid 钾盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 )10μg Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )1mg
Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL Acridine Orange(AO)100mg
PD 98059(MAPKK 抑制剂 )2mg Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
PDTC(NF-κB
硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管1只 糖蛋白 PAGE 染液1套
硅胶膜离心吸附柱再生液500 次 探针标记专用 PCR Mix 0.5mL
酸洗玻璃珠系列10g 痰液采集器1个
硅基磁珠2mL 痰液 DNAout50 次
氨基磁珠2mL 羧基磁珠2mL
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次 电泳级甘油100mL
T7 体外转录试剂盒50 次 电泳级二甲苯蓝 FF 溶液，1%10mL
SP6 体外转录试剂盒50 次 电泳级橙黄 G 溶液10mL
T3 体外转录试剂盒50 次 电泳级丙溶液 ( 干粉型 )200mL
m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD 电泳级 TEMED1.5mL
贝酵母 福氏志贺氏菌
粟褐芽孢杆菌 松生拟层孔菌
雅致放射毛霉＝葡匐放射毛霉 露湿漆斑菌
棉铃虫拟青霉 0.5%葡萄糖肉汤100ml
苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki 隐甲藻
多头霉 弗氏链霉菌
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae 两型孢毛霉
产黄青霉 卷枝毛霉
杏鲍菇 生香毛霉
0.1%蛋白胨水溶液100ml 痢疾志贺菌CMCC51252冻干粉南京便诊
Rosetta 感受态细胞10×100μL说明书黑球漆斑菌 奇异翅孢壳
苏云金芽胞杆菌莫里逊亚种Bacillusthuringiensissubsp.Morrisoni 产气肠杆菌冻干粉
蜜二糖发酵管5ml 30 支/盒 褐球固氮菌
云芝 韩国丛毛单胞菌
芽孢杆菌 青色链霉菌
操作步骤:
1. Rosetta 感受态细胞10×100μL说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验proteins, termed Rosetta stone sequences, help link disparate proteins together, and suggest the likelihood of functional interactions between the linked entities, describing local and global relationships within the proteome. These relationships help
Redesigning the Specificity of ProteinDNA Interactions with Rosetta
, we present the current state of protein–DNA interface design with the Rosetta macromolecular modeling program. The LAGLIDADG endonuclease family of DNA-cleaving enzymes, under study as potential gene therapy reagents, has been the main testing ground
Rosetta Ligand Docking with Flexible XML Protocols
[1]. The latest release of Rosetta ligand software includes many new features, such as (1) docking of multiple ligands simultaneously, (2) representing ligands as fragments for greater flexibility, (3) redesign of the interface during docking, and (4) an XML
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