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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 英文名:
脱脂奶粉 ( 杂交专用 )
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50g

服务流程:
1)脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. 脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
链脲佐菌素(标准品)18883-66-4质量规格:HPLC>98%,标准品
硝酸硫康唑82382-23-8质量规格:>98.0%,JP2002
硝酸硫康唑(标准品)82382-23-8质量规格:HPLC>98%,标准品
舒尼替尼碱557795-19-4质量规格:>98.5%
舒尼替尼碱(标准品)557795-19-4质量规格:HPLC>98%,标准品
异辛醇(分析标准品,≥99.5%)2-Ethyl-1-hexanol质量规格:分析标准品,≥99.5%
2-乙基-1,3-己二醇(标准品)2-Ethyl-1,3-hexanediol质量规格:分析标准品
甲基磺草酮(标准品)Mesotrione质量规格:分析标准品
癸酸甲酯(分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC))Methyl decanoate质量规格:分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC)
十二酸甲酯(标准品)Methyl laurate质量规格:分析标准品
盐酸尼莫司汀质量规格:>97.0%,BR,可用于细胞培养Nimustine HCl(ACNU)
BEZ235 (Dactolisib)质量规格:>98%;ATP竞争性PI3K和mTOR抑制剂NVP-BEZ 235
吡嘧司特钾质量规格:>98%Pemirolast potassium
培哚普利质量规格:>98%盐形式Perindopril erbumine
保泰松质量规格:>98%,USPphenylbutazone
白色念珠菌ATCC90029冻干粉 大肠埃希氏菌(大肠杆菌) 血清型:O6:K54:H10
绳状青霉 枯草芽孢杆菌枯草亚种 产葡聚糖酶
裂殖壶菌 迟缓芽孢杆菌
硫乙醇酸盐流体培养基100ml 不动杆菌属
霉 香蕉炭疽盘长孢菌
臭曲霉 惰性解油螺旋菌
无壳曲霉 烟曲霉
白色念珠菌冻干粉 金头曲霉
铜绿假单胞菌 白黄侧耳、紫孢平菇、姬菇
大肠埃希氏菌(大肠杆菌) 琼氏不动杆菌
脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g说明书多头被孢 亚膜汉逊酵母
云芝 大肠埃希菌冻干粉
细黄链霉菌 谷氨酸棒杆菌
肺炎克雷伯菌冻干粉 嗜肺军团菌
费氏志贺氏菌 温特曲霉
实验步骤:
(1) 脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验所不能替代的,如限制性酶切片段的多态性 (RFLP) 的检测等。一、基因组 DNA 的制备(前述)二、基因组 DNA 的限制酶切根据实验目的决定酶切 DNA 的量。一般 Southern 杂交每一个电泳通道需要 10-30 μg 的 DNA。购买的限制性内切酶都附有相对应的 10 倍浓度缓冲液,并可从该公司的产品目录上查到最佳消化温度。为保证消化完全,一般用 2-4 U 的酶消化 1 μg 的 DNA。消化的 DNA 浓度不宜太高,以 0.5 μg/μl 为好。由于内切酶是保存在 50% 甘油
性酶切片段的多态性(RFLP)的检测等。 一、基因组 DNA 的制备(前述) 二、基因组 DNA 的限制酶切 根据实验目的决定酶切DNA的量。一般Southern杂交每一个电泳通道需要10-30μg的DNA。购买的限制性内切酶都附有相对应的10倍浓度缓冲液,并可从该公司的产品目录上查到最佳消化温度。为保证消化完全,一般用2-4U的酶消化1μg 的DNA。消化的DNA浓度不宜太高,以0.5μg /μl 为好。由于内切酶是保存在50%甘油内的,而酶只有在甘油浓度 具体
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