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- 百奥莱博
- QN4087-KFV
- 北京
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
219
- 英文名：
Q-Sepharose Fast Flow
- 保质期：
5年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
4～25℃
- 规格：
100ml
特别提示：包括Q-琼脂糖凝胶FF在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Q-琼脂糖凝胶FF
英文名称：Q-Sepharose Fast Flow
产品货号：QN4087
产品规格：100ml
本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
Q-琼脂糖凝胶FF是将三*胺基烷基季铵基团键合在高流速琼脂糖微球上形成的一种强阴离子交换介质。广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。本品为白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
亲和填料特性：
离子交换基团：-CH2N+(CH3)3
离子交换类型：强阴离子，可交换离子Cl-
基质：6%交联琼脂糖
蛋白质吸附容量：120mg HSA/ml介质
总离子交换量：0.18～0.25mmol/ml介质
形状：球形
粒径：45～165μm
流速：400～700cm/h(检测条件：层析柱10mm×300mm，柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/L NaCl)
工作温度：4～40℃
耐热：pH7水中120℃，30min
耐压：0.3MPa
pH值稳定性：1～14(短时间，在位清洗)；2～12(长时间)
pH工作范围：2～12
化学稳定性：所有常用的水相缓冲液(1mol/L氢*化钠；8mol/L尿素；6mol/L盐酸胍；70%乙醇；)
储存条件：4～25℃，有效期5年。
操作说明：
1．装柱
① 让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
② 根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶:缓冲液=3:1的比例）配成匀浆。
③ 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
④ 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
⑤ 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2～3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
2．平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡液是低浓度的缓冲溶液，如Tris、PBS等。
3．上样
① 样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。
② 一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
③ 介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH值。盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用DEAE介质时，推荐的pH值是小于目标产品等电点1个单位。
4．洗脱
Q琼脂糖凝胶FF介质可用增大盐浓度或减小pH值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。
5．再生
一般用高盐浓度的缓冲液（含1～2mol/L NaCl）洗或减小pH洗10倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
6．在位清洗
① 对于以离子键结合上去的蛋白，可以用2M NaCl去除。
② 对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用1M NaOH去除。
③ 对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异bǐng醇清洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。
清洗完毕后，用至少3倍缓冲液平衡柱子。
7．注意
在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
在使用过程中，不能使用强酸，如使用酸洗，应使用浓度低于0.1M的*醋酸。
8．去热源
用0.5M的氢*化钠清洗柱子5～6小时或用0.1M的氢*化钠24小时。或用以下方法步骤去除：
① 2倍柱体积的70%乙醇；
② 2倍柱体积50mM Tris-HCl pH7.5；
③ 1倍柱体积4M尿素；
④ 3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M NaCl；
以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。
9．消毒
用0.5～1M NaOH室温下洗8～10倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。
10．灭菌
置介质于高压灭菌锅中120℃下30分钟。
注意事项：
产品应密封贮存在4～25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。避免与氧化剂接触；避免在pH<4的环境中长时间暴露(一周,20℃)。
除了Q-琼脂糖凝胶FF,，我公司还供应以下相关产品：
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QN4042 葡聚糖凝胶G-15 25g|100g|500g
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QN4104 葡聚糖凝胶G-50 25g|100g|500g
QN4115 羧甲基纤维素钠CMC(粘度800-1200) 25g
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文献和实验色谱。是最有效的手段，关键了解目标物质的特性以便选择合适的亲和色谱填料。二、主要用途介绍1.去除内毒素内毒素也叫热源，一般是磷脂A ，糖类和蛋白，在中性条件下带有负电荷。内毒素的磷脂部分有很强的疏水性，一般的在高盐情况下它们会聚合，所以不能用疏水色谱，如果蛋白本身的疏水性强，可以选择把目标蛋白结合到疏水色谱填料（苯基琼脂糖凝胶FF ，丁基琼脂糖凝胶FF ）上和内毒素分离。内毒素因为带有很强负电荷，如果目标蛋白带阳电荷，用DEAE 琼脂糖凝胶FF 或Q 琼脂糖凝胶FF 把内毒素吸附，达到去除内毒素的目的
【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
[img][/img]Protein A 柱之进化 Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的Fc区结合。因而，将Protein A 与琼脂糖凝胶以一定的方式结合，可制备用于抗体纯化的亲和填料。 早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成，分子量约42KD，结构如图1所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强，可以吸附大量的lgG。但同时，天然
蛋白带阳电荷，用DEAE琼脂糖凝胶FF或Q琼脂糖凝胶FF把内毒素吸附，达到去除内毒素的目的。如果目标蛋白带阴电荷，可以尝试用阶段或梯度洗脱的方法把它们分离。 其中最有效而特异的方法是用亲和色谱填料去除内毒素，为此专门开发了两种专门去除内毒素的色谱填料，去内毒素琼脂糖凝胶FF和高效去内毒素琼脂糖凝胶FF可以很方便去除内毒素，其应用简单，效果明显，样品回收率高。方法是把适量的色谱填料加到样品中4度震荡40h左右无菌过滤就可以得到热源符合要求的样品，或者直接装柱然后循环上样8小时左右即可。 2. 去除
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