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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
27
- 英文名:
Origami B(DE3)plysS 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
0.1mL×10

服务流程:
1)Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 0.1mL×10说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 0.1mL×10说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 0.1mL×10说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
H-89(PKA 抑制剂 )1mg Calcein100mg
HDAC 抑制剂1g Calcein M 100mg
Hemoglobin(NO 清除剂 )1g Calcein Blue 250mg
Insulin18mg Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )5mg
Ionomycin( 钙离子载体 )250nmol Bradford 法蛋白定量试剂盒200mL
柱式植物叶绿体 DNAout15 次 溴化乙锭溶液 ,10 mg/mL1.5mL
线状 DNA 清除剂30 次 溴化乙锭清除剂100 次
细菌 DNAout50 次 溴化乙锭干粉 (EB)1g
细菌 DNAout250 次 星形细胞生长因子5mL
柱式细菌 DNAout50 次 星形胶质细胞生长因子5mL
小鼠抗 Flag 标签单抗100μL RNA 级 GuSCN( 异硫酸胍 )100g
福林酚试剂100mL RNA 级 Guanidium HCl ( 盐酸胍 )100g
卵白蛋白标准品,2mg/mL1mL RNA 级 EDTA·2Na ( 四乙酸二 )100g
牛血清白蛋白标准品,2mg/mL1mL RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g
牛血清 γ 球蛋白标准品,2mg/mL1mL RNA 级 DEPC ( 焦碳酸 )10mL
白色念珠菌冻干粉 微黄八叠球菌
猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种 长赤细菌
空肠弯曲杆菌 光孢短柄帚霉
恶臭醋酸杆菌混浊变种 异常汉逊酵母
银丝菇、丝盖小包脚菇 人苍白杆菌
丁酸梭菌 立枯多核菌
营养肉汤培养基7ml 耐盐芽孢杆菌
中华根霉 酪丁酸梭菌
新鞘醇单胞菌 黑菇、烟色红菇
枯草芽孢杆菌冻干粉 裂皮侧耳 食用
Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 0.1mL×10说明书哈茨木霉 沙保罗琼脂平板70mm
洁丽香菇豹皮菇 抗生链霉菌
木糖氧化产碱菌木糖氧化亚种 厌氧消化链球菌
大肠埃希菌CMCC44817冻干粉 马其顿假丝酵母
粉状毕赤酵母 酿酒酵母
实验步骤:
(1) Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 0.1mL×10说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验DNA Origami: Synthesis and Self‐Assembly
Stephanopoulos, N., Liu, M., Tong, G.J., Li, Z., Liu, Y., Yan, H., and Francis, M.B. 2010. Immobilization and one‐dimensional arrangement of virus capsids with nanoscale precision using DNA origami. Nano Lett. 10:2714‐2720
摘要: 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+).
Xl1-Blue菌株 基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。 特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。 用途:分子克隆和质粒提取。 BL21(DE3)菌株 基因型:F– ompT gal dcm
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