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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
47
- 英文名：
接头 DNA(Sal I-Sma I)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5nmol
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol费用详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol费用的相关产品：
DMSO，PCR 级1.5mL 固相 RNase 清除剂100mL
海藻糖溶液，1.5M，PCR 级1.5mL 钴柱介质10mL
甜菜碱溶液，5M，PCR 级1.5mL 骨骼肌细胞生长因子5mL
绿如蓝染料，PCR 级0.1mL 谷胱甘肽琼脂糖2mL
绿如蓝染料，PCR 级1mL 谷胱甘肽 S 转移酶1mg
陶瓷研钵 ( 直径 60 mm)1个 真菌 RNAout250 次
陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)1个 真菌 DNAout50 次
真空抽滤盒1套 长效期 SDS-PAGE 上样液1mL
第二章 “天净沙”DNA纯化产品 长效期 SDS-PAGE 配胶液200mL
非冻型血液 DNA 保存液100mL 长效期 SDS-PAGE 还原剂10mL
预稀释 BSA 蛋白标准品7×1mL RNA 级 CTAB ( 十六烷基基溴化铵 )100g
预稀释 BGG 蛋白标准品7×1mL RNA 级 b-Mercaptoethanol(2- )50mL
SDS-PAGE 制备试剂盒50 次 RNA 电泳液 ,10×250mL
考马斯亮蓝 R-25010g RNA 电泳液 ,10×100mL
考马斯亮蓝 G-25010g RIPA 裂解液 ( 中 )100mL
白黄侧耳、紫孢平菇、姬菇 昆明链霉菌 模式菌株
烟曲霉 律宾链霉菌 模式菌株，产律宾菌素。
改良马丁琼脂培养基70mm 粪肠球菌ATCC29212冻干粉
产气荚膜梭菌 食神鞘醇杆菌
戊糖乳杆菌 杏鲍菇
大球盖菇 杏鲍菇
谢瓦曲霉 鸡纵
橙色粘球菌 产黄青霉
白色念珠菌ATCC90028冻干粉 多头霉
大毛霉 谢瓦曲霉
接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol费用干酪乳杆菌 扇形平菇、扁形平菇
小肠结肠炎耶尔森氏菌 纺缍形赖氨酸芽孢杆菌
鸡纵 硫乙醇酸盐平板培养基70mm
蜜环菌 链格孢
发酵性酵母 硝基还原假单胞菌
操作步骤:
1. 接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验假设样本数为35：1、采用测序方案：测序一类的公司都可以，生工，英骏，奥科等，你提供PCR产物，他们进行测序。2、采用TAQMAN或MGB探针方案：基康，复旦悦达，联合基因等，强烈建议不要采用这种方案，特贵。3、采用微测序方案：翼和生物。就是应用LDR连接酶的反应，发射荧光的进行检测的。效果和价钱比较：测序要你自己做PCR，但测序的好坏要看你PCR产物的质量和测序公司的能力，价格大概在50元左右，总花费大约：50*35*12+前期的PCR费用=2万多。TAQMAN和MGB探针方案只需要你提供
测序法（cyclic-array sequencing），也可将其 称为“新一代测序技术或者第二代测序技术”。 所谓循环芯片测序法，简言之就是对布满DNA样品的芯片重复进行基于DNA的 聚合酶 反应（模板变性、 引物退火杂交及延伸）以及荧光序列读取反应。2005年，有两篇论文曾对这种方法做出过详细介绍。与传统 测序法相比，循环芯片测序法具有操作更简易、费用更低廉的优势，于是很快就获得了广泛的应用。 图1 传统的Sanger测序法及新一代DNA
Clontech是cDNA合成技术的引领者，近年来SMART(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术被公认为是微量RNA和单细胞RNA-seq的行业金标准。现在创新的DNA SMART技术将模板转换机制的优势拓展到了DNA分析，利用DNA SMART ChIP-Seq Kit无需接头连接即可构建ChIP测序文库，极大地缩短了实验进程。科学技术的发展有时需要突破实验技术的挑战，如何从染色质免疫共沉淀（ChIP）实验中获得的少量DNA制备新
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