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- 2025年07月11日
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45
- 英文名：
接头 DNA(EcoR I-Sma I)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5nmol
1）接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol品牌客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol品牌的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. 接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol品牌组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) 接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Dihydrorhodamine 123 10mg DNA 电泳分子量标准 (2)（50-400 bp）50 次
DiI( 细胞膜红色荧光探针 )10mg DNA 电泳分子量标准 (2)（300-5000 bp）50 次
DiIC1(5) 碘化物100mg DNA 电泳分子量标准 (100-600 bp)50 次
DiIC12(3) 高氯酸化物100mg DNA 电泳分子量标准 (100-5000 bp)50 次
DiO( 细胞膜绿色荧光探针 )10mg DNA 电泳分子量标准 (100-200
RNA 级 GuSCN( 异硫酸胍 )100g 真空抽滤盒1套
RNA 级 b-Mercaptoethanol(2- )50mL 真菌总蛋白质微量提取试剂盒50 次
RNA 级 Oligo(dT) 纤维素25mg 真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次
RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g 真菌种属鉴定 PCR Mix 6100 次
RNA 级 Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基乙酸 ) 100g 真菌种属鉴定 PCR Mix 5100 次
真菌种属鉴定 PCR Mix 4100 次 大提无内毒素质粒 DNAout5次
真菌种属鉴定 PCR Mix 5100 次 大提无内毒素质粒 DNAout10 次
真菌种属鉴定 PCR Mix 6100 次 大鼠肿瘤细胞分离液 1.061200mL
真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次 大鼠中性粒细胞分离液 1.091200mL
古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次 大鼠胰岛细胞分离液 1.063200mL
白黄侧耳、紫孢平菇、姬菇 阿尔莱特葡萄球菌
烟曲霉 越南伯克霍尔德氏菌
蜜二糖发酵管5ml 30 支/盒 滑菇、光帽黄伞
醋酸醋杆菌 多主枝孢（蜡叶芽枝霉）
苏云金芽胞杆菌幕虫亚种 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus 偶然分支杆菌ATCC 6841
大毛霉 嗜盐四联球菌
鹿皮色曲霉 红霉素链霉菌
黄色粘球菌 白色念珠菌冻干粉
近平滑念珠菌ATCC22019冻干粉 痤疮杆菌
米根霉 嗜酸乳杆菌
接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol品牌干酪棒杆菌(乳酪棒杆菌) 冰核细菌
枯草芽孢杆菌CMCC63501冻干粉南京便诊 溶壁微球菌
生孢梭菌(产芽孢梭状芽孢杆菌) 黑菇、烟色红菇
纳地青霉 耐盐芽孢杆菌
谢氏杆菌 木层孔菌
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文献和实验的生产商，之后，公司就致力于开发、生产免疫诊断试剂，特别是自身免疫性疾病方面的诊断试剂。公司的研发能力在该领域中得到了极高的评价。MBL的自身免疫性疾病的诊断剂对医药界贡献非常大，该公司产品在自身免疫性疾病方面占据了日本国内市场80％的份额，在海外市场也同样受到欢迎。近年来，MBL大力引进重组DNA细胞和细胞融合技术来开发用于疾病诊断和疗效观察的诊断试剂。另外，公司开发了大量分子生物学和细胞生物学研究的产品，包括抗体和可溶性Fas ELISA试剂盒。 Cell Signaling
PCR 技术现在已成为现代分子生物学实验工作的基础技术和有效工具，在医学、农业、检验检疫等领域中使用十分广泛。其核心设备－PCR仪经过不断改进，已经越来越完善和智能化，分类也更加细化，但厂家一般自行命名型号，技术指标的参数也不统一，给用户的选择带来了困惑和麻烦。总体来说PCR仪可分为普通PCR仪、梯度PCR仪器和实时荧光定量PCR仪等。下面将列出一些生产商/品牌供评比。 仪器名称产地/品牌型号1实时荧光定量PCR仪美国StratageneMx3000P,Mx3005P2PCR仪英国
切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割,产生平末端的DNA 片段(如Sma:5"-CCC↓GGG-3");有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA 片段称粘性未端, 如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 5"…G↓AATTC…3" →5"…G AATTC…3" ;3"…CTTAA↑G …5" →3"…CTTAA G…5" 2.DNA 纯度、缓冲液、温度条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。大部分限制性内切
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