克必隆 B 载体2μg费用

服务流程：
1）克必隆 B 载体2μg费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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储存事项:
A. 克必隆 B 载体2μg费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 克必隆 B 载体2μg费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) 克必隆 B 载体2μg费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )1次  柱式酵母质粒 DNAout50 次
96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )5次  柱式酵母 DNAout50 次
96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )1次  柱式酱油 DNAout10 次
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次  柱式海洋动物 DNAout50 次
一站式柱式 miRNAout50 次  柱式骨骼 DNAout50 次
柱式土壤 RNAout50 次  柱式微生物基因组 DNAout 50 次
真菌 RNAout50 次  柱式土壤 RNAout50 次
真菌 RNAout250 次  柱式土壤 DNAout50 次
柱式真菌 RNAout50 次  柱式探针纯化试剂盒10 次
柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒50 次  柱式水样 DNAout50 次
柱式细菌 DNAout( 含溶菌酶 )50 次  新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
大提柱式细菌 DNAout4次  辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)5g
大提柱式细菌 DNAout( 含溶菌酶 )4次  辛甲基 β 葡糖苷1g
百万碱基级细菌 (G-)DNAout10 次  心肌细胞生长因子5mL
百万碱基级细菌 (G+)DNAout10 次  小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL
Hydrotaleaflava   鼠伤寒沙门菌ATCC13311冻干粉
大豆根瘤菌   短密青霉
小刺青霉   卧孔菌
鸟氨酸脱羧酶试验培养基2ml 30 支/盒   淡天蓝色链霉菌
哈氏弧菌   苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis
大肠埃希菌ATCC25922冻干粉   菊糖芽孢乳杆菌  模式菌株。生产D-乳酸。
刺孢吸水链霉菌   豇豆慢生根瘤菌  与柱花草共生固氮
里氏木霉   产酸克雷伯氏菌
银耳、白木耳   清酒酵母
缓冲蛋白胨水9ml 30 支/盒   栗酒裂殖酵母
克必隆 B 载体2μg费用福氏志贺氏菌   罗伊氏乳杆菌
多型孢毛霉   发根土壤杆菌（发根植物单胞菌）
0.1%蛋白胨水溶液200ml   苜蓿根瘤菌
肠炎沙门氏菌肠炎亚种   明亮发光杆菌
苏云金芽胞杆菌苏云金变种 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis   化脓性链球菌ATCC19615冻干粉