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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
55
- 英文名：
天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
80 次
天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次品牌详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次品牌的相关产品：
艾力替尼甲磺酸盐(AST1306)1050500-29-2质量规格：>98%,BR
拉罗皮兰,MK0524571170-77-9质量规格：>98%,BR
盐酸头孢噻呋103980-44-5质量规格：>98%,BR
盐酸头孢噻呋(标准品)103980-44-5质量规格：含量测定
扎鲁司特107753-78-6质量规格：>99%,BR
赫斯特荧光燃料33258bisBenzimide H 33258 质量规格：>98%,进分
赫斯特荧光燃料33342bisBenzimide H 33342 trihydrochloride质量规格：>98%,进分
Fluo-3 AM;钙荧光探针Fluo 3-AM 质量规格：>90%,进口
Indo 1-AM;钙荧光探针Indo 1-AM质量规格：>95%,进口
Fluo 4-AM;钙荧光探针Fluo 4-AM质量规格：>95%,进口
盐酸苯海拉明-d6质量规格：美国进口Diphenhydramine-d6 Hydrochloride
普仑司特半水合物质量规格：美国进口Pranlukast hemihydrate
(R)-美托洛尔质量规格：美国进口(R)-Metoprolol
α-羟基美托洛尔(非对映异构体混合物)质量规格：美国进口α-Hydroxy Metoprolol(Mixture of Diastereomers)
(S)-美托洛尔质量规格：美国进口(S)-Metoprolol
小鼠CD19分子(CD19)ELISA试剂盒 ，英文名： CD19 ELISA Kit
大鼠白细胞分化抗原44(CD44)ELISA检测试剂盒RatclusterOfdiffereiation,CD44ELISAKit 96T/48T
人CD82分子(CD82)免疫试剂盒 Human CD82 ELISA Kit
英文名称MousetelomeraseELISAKit小鼠端粒酶(telomerase)规格：96T/48T
冰冻切片平滑肌组织染色试剂盒50次
RatAquaporin0,AQP-0ELISA试剂盒大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human helical peptide (Helical Peptide) ELISA Kit 人螺旋肽(Helical Peptide)ELISA试剂盒
Humanhydroxylysine,HylELISAKit 人羟赖氨酸(Hyl)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
DuckImmunoglobulinE,IgEELISA试剂盒鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
载玻片细胞组蛋白H3-K9甲基化荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MousedipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次品牌小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠生长激素（GH）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠生长调节致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作步骤:
1. 天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验流程如下： 基于 TCR/BCR 检测的 V(D)J 区域靠近 5' 端，故免疫组库测序所用磁珠标签序列由也单细胞最末端的 polydT 序列改为 TSO 序列，构成 read1+barcode+UMI+TSO 的标签组成，用于单细胞的捕获识别和后续 5' 端 RNA 的抓取捕获。 如图, 凝胶珠上的序列中，barcode 序列用于标记细胞，UMI 序列用于标记转录本，而 TSO (template switch oligo) 用于 5’ 端捕获。 当磁珠与细胞结合并在油包水环境中反转
单细胞测序在疾病诊断和细胞异质性研究中发挥着重要作用。然而目前的单细胞测序手段需要将细胞消化并裂解才能够进行，而细胞状态在这一操作中不可避免的会发生改变，因此很难掌握细胞真实的基因表达情况，尤其对于基因通路上表达变化的检测为不利。近期苏伊士理工大学使用FluidFM创建了一种原位活细胞基因测序方法，这种方法能够在不杀死细胞的情况下完成对细胞的测序工作。通过这种技术该团队成功完成单细胞RNA基因测序，并通过这种方法检测到了细胞的基因表达和细胞周期状态变化。下面本文就这项工作的具体内容进行阐述
单细胞测序悬液老是制备失败？别担心，单细胞核测序来拯救你的样本了
虽然单细胞测序到现在已经应用到各个研究领域，但是实际的实验过程中依然会遇到很多问题，比如： 1.很多样本根本没有办法制备单细胞悬液，比如已经在-80℃冻存的样本； 2.有些样本制备成单细胞悬液以后现有的单细胞测序平台无法捕获，比如心肌细胞、骨骼肌细胞、成熟的脂肪细胞等，由于直径过大，超出了10x genomics和BD Rhapsody平台最大能捕获的细胞直径； 3.再者有些细胞类型可能在单细胞悬液制备的过程中丢失，比如脑部的新生神经元、肾脏的肾小球足细胞和肾小球系膜细胞等都会在单细胞
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