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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
天净沙非同位素探针杂交试剂盒
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5次
服务流程：
1）天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次品牌客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次品牌组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
环孢菌素,环孢素A,环孢霉素A（标准品）59865-13-3质量规格：HPLC>98%,标准品
盐酸噻氯匹定53885-35-1质量规格：>99%,BR
盐酸噻氯匹定（标准品）53885-35-1质量规格：HPLC>98%,标准品
阿糖胞苷(进分)147-94-4质量规格：进分,Sigma C1768
阿糖胞苷147-94-4质量规格：>99.0%,细胞培养级
蔗糖磷酸化酶Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides质量规格：BC Grade
磺胺二甲嘧啶钠(>99%,BP)Sulfamethazine sodium salt质量规格：>99%,BP
磺溴酞钠(>98%,BR)Sulfobromophthalein disodium salt hydrate质量规格：>98%,BR
Sulfo-MBSSulfo-MBS质量规格：BR
四庚基溴化铵(>98%,BC)Tetraheptylammonium bromide质量规格：>98%,BC
硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)质量规格：>99.5%(GC),标准物质Methyl Stearate
亚麻酸甲酯(>98.0%(GC),标准物质)质量规格：>98.0%(GC),标准物质Methyl Linolenate
亚油酸甲酯(>99.0%(GC)，标准物质)质量规格：>99.0%(GC)，标准物质Methyl Linoleate
1-十一烯(>99.5%(GC),标准物质)质量规格：>99.5%(GC),标准物质1-Undecene
1-十二烯(>99.5%(GC),标准物质)质量规格：>99.5%(GC),标准物质1-Dodecene
孢囊杆菌 表皮葡萄球菌ATCC12228冻干粉
栗酒裂殖酵母 雅致枝霉
绿色木霉=木素木霉 红法夫酵母
烟曲霉 Slackiaequolifaciens 模式菌株
毛木耳(紫木耳、黄背木耳) 长赤细菌 模式菌株，产生细菌叶绿素
醋酸菌 荨麻青霉
大肠埃希菌冻干粉 流感嗜血杆菌冻干粉
阴沟肠杆菌 生孢梭菌
马链球菌兽疫亚种 苏云金芽胞杆菌九州亚种 Bacillus thuringiensis subsp. kyushuensis
花生根瘤菌 拉曼被孢霉
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次品牌蛾微杆菌 刺孢小单孢菌绛红变种
粪产碱杆菌 阿舒多囊霉
干燥棒杆菌 猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种
白色念珠菌ATCC10231冻干粉 顶青霉
少根根霉 大肠杆菌Escherichiacoli
实验步骤：
(1) 天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验液层和红细胞层（见图1）。 图1 稀释脐带血离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的RPMI 1640培养基洗涤细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 血液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24h内的血液进行CBMC分离。 2） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械性的损伤。 3） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 4 脐带血单个核细胞分离试剂盒
2）。 图2 细胞悬液离心前后的分层状态图 5）向离心管中加入10mL 的RPMI 1640培养基洗涤细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1）不同种属动物单个核细胞的比重有一定差异，请选择合适的分离液进行脾脏单个核细胞的分离。 2）分离液易挥发，在脾脏研磨过程中请尽量缩短时间，将研磨时间控制在5min以内。 3）研磨过程中请尽量控制研磨力度，保证细胞筛悬空，避免在培养皿底部直接研磨而造成细胞大量死亡。 4）若研磨
层（见图1）。 图1 稀释骨髓液离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的生理盐水或PBS重悬细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 不同种属动物单个核细胞的比重有一定差异，请选择合适的分离液进行骨髓单个核细胞的分离。 2） 骨髓液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24小时内的骨髓液进行单个核细胞分离。 3） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械
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