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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
20 次
以下是一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次多少钱的详细介绍,点击了解更多克隆及表达产品:操作流程:
1.一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次多少钱根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
实验要点 :
1.一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次多少钱CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
储存事项:
A. 在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
以下是一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次多少钱的相关产品:
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human S-adenosylmethionine synthase isoform type-1
0.156-10 ng/mL 人细小病毒(B19)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
HGFA / HGF activator 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
GGCT 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
Fumarate Hydratase / FH 抗體, 鼠單抗 ELISA WB IP 50 µg
S100A10 抗體, 鼠單抗 IHC-P 50 µg
78-5000 pg/mL 人NAD依赖性脱乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)ELISA试剂盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-17D
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Poly [ADP-ribose] polymerase 1
7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon alpha-8
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Carnitine O-palmitoyltransferase 1, liver isoform
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次多少钱N-羟乙酰神经氨酸 N-Glycolylneuraminic Acid 1113-83-3 质量规格:美国进口
黄芩苷;黄芩甙 CAS 21967-41-9 规格: HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询
N,N-二去甲基盐酸曲美布汀-d5 N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5 Hydrochloride 1189893-33-1 质量规格:美国进口
酸卡那 CAS 规格: 200mg 订购|咨询
N,N-二去甲基盐酸曲美布汀 N,N-Didesmethyl Trimebutine Hydrochloride 84333-60-8 质量规格:美国进口
甲喹 对照品 CAS 规格: 200mg;99.7% 订购|咨询
N-去甲基盐酸曲美布汀 N-Demethyl Trimebutine Hydrochloride 294882-33-0 质量规格:美国进口
磺胺吡嗪钠 对照品 CAS 规格: 200mg 订购|咨询
柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸 Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide 158196-35-1 质量规格:美国进口
(酸)卡那 标准品 CAS 规格: 150mg 订购|咨询
(±)-柚皮素 (±)-Naringenin 67604-48-2 质量规格:美国进口
知母皂苷E;Anemarsaponin CAS 136565-73-6 规格: 20mg 订购|咨询
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文献和实验PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接) 【实验目的】 1.掌握DNA回收和连接的基本原理。 2.学习和掌握PCR产物的T-vector克隆。 【实验
3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit)Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T
现象可能原因解决方案 转化后无菌落生长 感受态细胞已经失效用pUC18质粒进行转化,确认细胞的感受态效率。1ng pUC18质粒至少应得到1000个以上的转化子。如有问题,重新制备感受态细胞。 平板所用抗性不对pBS-T载体为amp抗性,工作浓度 100 ug/ml 连接中使用了不恰当的vector:insert 比例估计PCR产物的量,将vector:insert比例限制在3:1到 1:5的范围内。对于极小的PCR产物进行克隆,很可能因为PCR产物严重过量,导致无菌落或菌落极少。 白色
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