4×dNTPs(100mM)

特别提示：包括4×dNTPs(100mM)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：4×dNTPs(100mM)
产品货号：QN0964
产品规格：4×100μl|4×400μl|4×1ml

本品包含了四支核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)，浓度100mM，溶于水中，可用于聚合酶链式反应(PCR)、测序、填补、切口平移、cDNA 合成及TdT 加尾反应。

储存条件：-20℃，有效期至少2年。

除了4×dNTPs(100mM),，我公司还供应以下相关产品：



名称：25mM氯化镁溶液(PCR级MgCl2溶液)
货号：BTN90302
规格：5mL
本产品为专门用于PCR的MgCl2，其浓度为25mM，可以用于调节MgCl2的最佳浓度。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：6nt随机引物(0.5 ug/uL)
货号：BTN100409
规格：5μg
本产品为长度为6nt的随机引物，序列为5´-(NNNNNN)-3´，主要用于以任何RNA为模板合成cDNA，也可以用于DNA探针的随机引物标计。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

疑难解答：
Q：在合成cDNA时，使用Oligo dT12-18和用随机引物有何区别？
A：只有当以带polyA尾巴的RNA作为模板才能使用Oligo dT作为引物，而任何RNA模板都可以使用随机引物。使用后者的序列覆盖率比使用Oligo dT更高。

名称：PCR试剂盒(含Taq酶，Buffer，dNTP，上样液)
货号：YT379
规格：400次|2000次
本PCR试剂盒带有Taq DNA Polymerase（YT371）、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液，自备模板和引物即可进行PCR反应，适合用于普通的PCR或RT-PCR定性或定量检测，也可以用于不太长的的DNA片段的克隆。本试剂盒用于50微升的PCR反应体系，足够用于160个反应，用于20微升的PCR反应体系，足够用于400个反应。

产品组份：
Taq DNA Polymerase(5U/μl)————200U
10×PCR Buffer(with Mg2+)————1ml
dNTP(2.5mM each)—————————0.7ml
6×DNA Loading Buffer——————1ml

储存条件：-20℃。

名称：核酸酶/RNA/DNA清除剂(喷雾清除剂)
货号：YT402
规格：250ml
本品是一种高效清除实验仪器、设备、材料固相表面的RNase和DNase等核酸酶污染的无毒喷洒型试剂，主要用于创造洁净的DNase和RNase Free操作环境；同时，本产品还能清除环境中DNA和RNA的污染。

本产品能有效清除RNase、DNase、RNA和DNA，具体的使用效果优于进口品牌同类产品对RNase、DNase、DNA和RNA的作用效果。

本产品使用比较安全，无毒性，但略有腐蚀性，在某些用途方面是一种非常安全的DEPC替代品。

本产品使用便捷。使用时直接将本产品均匀喷洒于固体表面，约5分钟后用洁净纸巾擦拭干净即可进行后续的实验操作。本产品适用于实验仪器设备如PCR仪、离心机、移液器、实验台、试管架、离心管架、电泳槽等，及实验耗材如离心管、枪头、手套等表面核酸酶污染的清除，对于塑料制品、乳胶制品、玻璃制品、不锈钢制品均有效。

注意事项：
1）本产品每次使用后应当拧紧喷头，保证本产品的密闭保存，避免长时间接触空气，以免影响使用效果。
2）使用本产品清除实验器材等表面的核酸酶污染后，仍需注意戴手套、口罩等进行操作，以免工作环境和样品被污染。
3）本产品用于仪器设备时，仅限于仪器设备表面可以擦拭清洗的地方，严禁本产品流入仪器设备内部，以免影响或破坏仪器设备的正常运行。

储存条件：室温密封，有效期一年。

名称：SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料)
货号：WE0136
规格：1ml|5ml
  本品是专用于染料法(SYBR Green I)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料和Mg2+，操作简单。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。
  本品所含的荧光染料SYBR Green I 可以与所有的双链DNA结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。其中BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制了非特异性的PCR扩增，显著提高了PCR的扩增效率。该产品适用于无需ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪，如：Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96。

试剂盒组成：

组份	1ml	5ml
2×SuperSYBR Mixture	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

产品特点
1、本产品中使用了全新高效热启动酶BaldStar Taq DNA Polymerase与独特的PCR缓冲体系，显著提高PCR的扩增效率，具有高灵敏度和特异性强的特点。
2、适用于荧光定量PCR检测，能够准确地对目的基因进行定量和检测。

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有SYBR Green I荧光染料，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
5、配制反应液时，请使用新的或者无污染的枪头和离心管，尽量防止污染。

操作步骤：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×SuperSYBR Mixture	2 5μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3)推荐反应体系为50μl，也可以根据实际实验需求按比例扩大或者缩小反应体系。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

建议采用下表显示的两步法PCR进行程序设定，本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例。若因Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR 扩增，三步法操作步骤详见《反应条件的优化》。
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40 个循环
退火/延伸	60℃	1 min
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
3)本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

反应条件的优化：
在荧光定量反应条件优化时，应从引物浓度、退火温度、延伸时间等方面进行考虑，以提高反应特异性和扩增效率。
1、反应特异性和扩增效率高的实验体系应具备以下条件：
1)反应特异性高：阴性对照无引物二聚体等非特异性扩增；不产生目的片段以外扩增。
2)扩增效率高：Ct值低；PCR扩增效率高，接近理论值100%。
2、反应条件优化方法：
1)引物浓度：通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。若提高反应特异性，可降低引物浓度；若提高扩增效率，可增加引物的浓度，由此优化反应体系。
2)退火温度：建议采用两步法PCR，退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)延伸时间：建议采用两步法PCR，延伸时间1 min进行反应。若提高扩增效率，可尝试将延伸时间增加，或尝试三步法PCR。
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

三步法荧光定量PCR(本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例)：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	10 s	35-40个循环
退火	56-64℃	30s
延伸	72℃	32s
融解曲线分析	95℃	15s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度。
3)若需提高反应扩增效率，可适当增加延伸时间。
4)本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融