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上海机纯实业有限公司
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常温,避光
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200ml/KIT
品牌: gelatins
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保质期: 6个月
保存条件: 常温,避光
小鼠肿瘤组织巨噬细胞分离液产品为本公司畅销的产品之一
中文名:小鼠肿瘤组织巨噬细胞分离液
产品规格:200ml/KIT
用途:本产品仅供实验室药品检测用,不作其他用途。
购买我公司的小鼠细胞分离液我们将免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧。
分离原理:
除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30分钟。通过离心,迁移能力不同终形成不同的细胞层。
大部分的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收,在进一步去除血小板,LSM和血浆。
用途:
用于体外分离人外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞。
分离方法:
分离混合血液白细胞早期的方法,总是伴随红细胞聚集,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞密度增加聚集,同时可以从离心管上部收集白细胞。
通过使用甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在甲泛影钠溶液中分层,低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞,和单个核细胞(淋巴细胞)和血小板可以从两个分层之间收集。
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文献和实验最近做了很多小鼠腹腔巨噬细胞, 有如下几个问题需要和大家讨论,望经验丰富的同志指点一二。 1. 关于是否注射淀粉肉汤或是别的刺激物, 是不是注射后有两大特点:第一,得到的细胞更多, 第二,得到的细胞都是炎性巨噬细胞, 而未注射则是非炎性细胞? 我做了十来次, 有时注射有时不注射(淀粉肉汤), 注射后细胞确实多一些。 至于炎性与非炎性,有待指教。 2. 关于分离的巨噬细胞的纯度问题。 我这里碰上一个严重的问题就是成纤维细胞的污染。 一开始纯化完铺板, 基本上看不到
目的要求 1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程 基本原理 细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合
RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
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