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- XY-TE-0761
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
两年
- 英文名：
Universal WGA Kit
- 库存：
900
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
单孢子全基因组扩增试剂盒产品及特点：本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、 经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点：
1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2. 可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。
3. 可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞， 真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷，恒温（30℃）反应，无须PCR仪即可实现扩增。
5. 产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、 文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异， 微卫星差异，SNP，STR）等。
单孢子全基因组扩增试剂盒自备试剂：超纯水（无 DNA 和 DNase 污染）
运输及保存：
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
单孢子全基因组扩增试剂盒使用方法
本产品适用于纯化好的基因组DNA。
一、碱变性（碱变性法一般好于热变性法，推荐用户使用）
1. 在 PCR塑 料 管 中 加 入 不 超 过 2.5uL 纯 化 好 的 基 因 组 DNA 或 用 量 在 100pg-100ng之间。如果体积不足2.5uL,则用超纯水补齐。最好同时做 一个不加DNA模板的阴性对照。
2. 加入等体积（2.5μL）变性液，轻柔吹打混匀。
3. 室温放置2-5分钟。
4. 加入5uLWGA中和液。此时样品总体积为10uL。
单孢子全基因组扩增试剂盒二、WGA反应
1. 在10uL DNA样品中，加入10 μL的 WGA Mix，轻柔吹打混合均匀。
2. 加入0.5 uL Phi 29 DNA聚合酶（10U/uL），轻柔吹打混合均匀。
3. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如 果采用30℃水浴，最好在样品管中加入30-50uL石蜡油以防水分蒸发，因 为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分 的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可 检测到DNA扩增。
4. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。
注：由于phi29 DNA聚合酶 有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
5. 立即取5-10 uL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
6. 扩增的DNA可以用于后续试验或当冰箱长期保存。
单孢子全基因组扩增试剂盒技术资料
WGA 原理图
圆球表示 phi 29DNA 聚合酶
短蓝线表示随机引物
棕色线表示新合成的 DNA
单孢子全基因组扩增试剂盒相关产品：
1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2. 可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。
3. 可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞， 真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷，恒温（30℃）反应，无须PCR仪即可实现扩增。
5. 产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、 文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异， 微卫星差异，SNP，STR）等。
单孢子全基因组扩增试剂盒自备试剂：超纯水（无 DNA 和 DNase 污染）
运输及保存：
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
单孢子全基因组扩增试剂盒使用方法
本产品适用于纯化好的基因组DNA。
一、碱变性（碱变性法一般好于热变性法，推荐用户使用）
1. 在 PCR塑 料 管 中 加 入 不 超 过 2.5uL 纯 化 好 的 基 因 组 DNA 或 用 量 在 100pg-100ng之间。如果体积不足2.5uL,则用超纯水补齐。最好同时做 一个不加DNA模板的阴性对照。
2. 加入等体积（2.5μL）变性液，轻柔吹打混匀。
3. 室温放置2-5分钟。
4. 加入5uLWGA中和液。此时样品总体积为10uL。
单孢子全基因组扩增试剂盒二、WGA反应
1. 在10uL DNA样品中，加入10 μL的 WGA Mix，轻柔吹打混合均匀。
2. 加入0.5 uL Phi 29 DNA聚合酶（10U/uL），轻柔吹打混合均匀。
3. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如 果采用30℃水浴，最好在样品管中加入30-50uL石蜡油以防水分蒸发，因 为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分 的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可 检测到DNA扩增。
4. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。
注：由于phi29 DNA聚合酶 有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
5. 立即取5-10 uL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
6. 扩增的DNA可以用于后续试验或当冰箱长期保存。
单孢子全基因组扩增试剂盒技术资料
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圆球表示 phi 29DNA 聚合酶
短蓝线表示随机引物
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