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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
两年
- 英文名:
Universal WGA Kit
- 库存:
900
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2. 可以扩增基因组达上万倍,具有高产量和高保真性的特点。
3. 可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞, 真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
5. 产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、 文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异, 微卫星差异,SNP,STR)等。

单细胞全基因组扩增试剂盒自备试剂:超纯水(无 DNA 和 DNase 污染)
运输及保存:
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
单细胞全基因组扩增试剂盒使用方法
本产品适用于纯化好的基因组DNA。
一、碱变性(碱变性法一般好于热变性法,推荐用户使用)
1. 在 PCR塑 料 管 中 加 入 不 超 过 2.5uL 纯 化 好 的 基 因 组 DNA 或 用 量 在 100pg-100ng之间。如果体积不足2.5uL,则用超纯水补齐。最好同时做 一个不加DNA模板的阴性对照。
2. 加入等体积(2.5μL)变性液,轻柔吹打混匀。
3. 室温放置2-5分钟。
4. 加入5uLWGA中和液。此时样品总体积为10uL。
单细胞全基因组扩增试剂盒二、WGA反应
1. 在10uL DNA样品中,加入10 μL的 WGA Mix,轻柔吹打混合均匀。
2. 加入0.5 uL Phi 29 DNA聚合酶(10U/uL),轻柔吹打混合均匀。
3. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如 果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50uL石蜡油以防水分蒸发,因 为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分 的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可 检测到DNA扩增。
4. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。
注:由于phi29 DNA聚合酶 有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
5. 立即取5-10 uL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
6. 扩增的DNA可以用于后续试验或当冰箱长期保存。
单细胞全基因组扩增试剂盒技术资料
WGA 原理图
圆球表示 phi 29DNA 聚合酶
短蓝线表示随机引物
棕色线表示新合成的 DNA

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