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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
剥离硅烷
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50mL
(1) 剥离硅烷50mL说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是剥离硅烷50mL说明书的详细介绍点击了解更多核酸电泳及回收产品:

储存事项:
A. 剥离硅烷50mL说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 剥离硅烷50mL说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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磷酸化肿瘤血管内皮标志物8抗体 Anti-phospho-TEM8 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化自噬相关蛋白4A抗体 Anti-phospho-ATG4A WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化自噬相关蛋白16A抗体 Anti-phospho-ATG16A WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化蛋白激酶AKT3抗体 Anti-phospho-AKT3 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
剥离硅烷50mL说明书肿瘤转移抑制蛋白1 Anti-MTSS1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
肌球蛋白轻链激酶抗体 Anti-MLCK WB IHC-P IHC-F IF 100ul
MYCBPAP抗体 Anti-MYCBPAP WB IHC-P IHC-F IF 100ul
线粒体核糖体蛋白S22抗体 Anti-MRPS22 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
棕榈酰化膜蛋白7抗体 Anti-MPP7 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
服务流程:
1)剥离硅烷50mL说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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文献和实验倍数1000120015001800200025003000350040001:100溶血素0.100.100.100.100.100.100.100.100.10生理盐水0.901.101.401.701.902.402.903.403.90全量1.001.201.501.802.002.503.003.504.00另取小反应管一列,按次序从每一稀释液取0.50ml分别加入各管中,添加时应由稀释度大的稀释液加起,这样可不必更换吸管。然后再加入生理盐水1.00ml,1︰20补体和2.50%红细胞悬液各0.50ml。在37℃水浴槽中放20min后判定结果。详细造作程序见表
支 100支 250根 说明书 1份 1份 l份 注: a)Solution I内含RNaseA,每次实验结束后,4℃保存。 b)温度低时,Soluion II有白色沉淀析出,37度以下保温溶解,摇匀后使用。 c)首次使用前,必须在Wash Solution 瓶中加入50ml无水乙醇,充分混勾后使用。每次使用后将瓶盖旋紧,以保持Wash Solution中的乙醇含量。 d)TE pH8.0或者水均可以用十洗脱,但是用水洗脱DNA
小弟弟一次做电转,完全按照毕氏酵母说明书来,居然没长出来。第二次,按老板出国前留下的做,效果甚好!现贡献出来,望对大家有所帮助!小弟刚做酵母表达,在DXY受益匪浅!看到不少关于酵母电转的PROTOCOL,但基本上是按INVITROGEN上的步骤来的。小弟第一次也是照本宣科,可是没出来,后来又按导师留给小弟的PROTOCOL做了一次,转化效果特好。先将其贡献给大家,希望对大家有所帮助:Yeast Transformation Protocol (modified to a smaller
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