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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
低熔点琼脂糖
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5g
低熔点琼脂糖5g品牌详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是低熔点琼脂糖5g品牌的相关产品：
木糖醇 Xylitol 87-99-0 库存 15
木通苯乙醇苷B calceolarioside B 105471-98-5 库存 16
木犀草素 Luteolin 491-70-3 库存 17
木香烃内酯 Costundide 553-21-9 库存 18
耐斯糖 Nystose 1
Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G) 30462-34-1茶黄素-3-没食子酸酯厂家
Theaflavin-3＆#146;-Gallate (TF-3＆#146;-G) 2
Theaflavine-3,3＆#146;-digallate (TFBG) 33377-72-9茶黄素-3,3＆#146;-双没食子酸品牌
Saikosaponin A 2
Saikosaponin B
Echinocystic acid 510-30-5刺囊酸规格
Cyasterone 17086-76-9杯苋甾酮厂家
Proanthocyanidin B1 20315-25-7原花青素B1说明书
Buddleoside 480-36-4蒙花苷品牌
Harmine hydrochloride 343-27-1盐酸去氢骆驼蓬碱规格
结肠癌组织芯片 进口/国产
睾丸疾病组织芯片 进口/国产
甲状腺癌组织芯片 进口/国产
膀胱癌组织芯片 进口/国产
肺小细胞癌组织芯片 进口/国产
共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体 Anti-Aprataxin WB IHC-P IHC-F IF 100ul
三号染色体开放阅读框抗体 Anti-APRG1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
腺嘌呤磷酸核糖转移酶抗体 Anti-APRT WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化水通道蛋白2抗体 Anti-phospho-AQP2 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
ADP核糖基化因子1抗体 Anti-ARF1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
低熔点琼脂糖5g品牌膜相关环指蛋白8抗体 Anti-42071 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
膜相关环指蛋白9抗体 Anti-42072 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
酸激酶-M2 Anti-M2-PK WB IHC-P IHC-F IF 100ul
间皮素抗体 Anti-Mesothelin WB IHC-P IHC-F IF 100ul
基质金属蛋白酶-14抗体 Anti-MMP-14 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
操作步骤:
1. 低熔点琼脂糖5g品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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文献和实验（至少2 cm以上），在长波紫外灯下观察，用清洗过的刀片在目的片段前切下与目的片段同长，宽度适当（一般2 cm左右）的胶块。 注意： ①不要忘记在胶下垫一个新的塑料手套防止污染。 ②小心不要将回收胶切裂，同时注意与目的带相邻的切面要尽量平整。 3、将切好的回收胶块放在回收胶槽内，在切去胶块处加入低熔点琼脂糖胶，待其凝固后将其小心放回电泳槽继续进行电泳。小心低熔点琼脂糖凝胶块与原回收胶块的交界面易断裂。 4、待目的带完全进入低熔点琼脂糖
沉淀和取上清，有可能会误吸了微量的沉淀;另外干燥的程度也有点技巧，干过了不好洗脱，没干透又影响结果。后来的改进版本有将混合了纯化介质后的凝胶溶解液加入到一种离心过滤柱上，这种柱子不带纯化填料，只有一层过滤膜，离心过滤后，填料在柱子里，溶液被甩掉，这样就避免了上述的问题。 3.低熔点琼脂糖：传统手工操作方法之一，低熔点琼脂糖制备凝胶，电泳后切割目的条带，在TE溶液中65度保温融化，用传统的酚氯仿抽提，乙醇沉淀。这个方法需要用到酚氯仿等有机试剂，由于乙醇沉淀需时较长，现在用的人已经不多了。想当年
与凝胶浓度(t)成线性关系。 (3) 电压 低电压时，线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加，不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过5v/cm。 (4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显，不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变，但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱
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