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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0743
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
One-Tube ds cDNA Synthesis Kit
- 库存：
950
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下：
一管式双链cDNA合成试剂盒cDNA第二链合成的原理是用RNaseH使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNAPolymeraseI通过切口平移(nicktranslation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链，其原理图如下：
一管式双链cDNA合成试剂盒本产品具有下列特点：
1.即开即用，含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含polyrA的RNA，对不含polyrA的RNA（如细菌RNA），不能使用本试剂盒制备dscDNA。
3.一管式进行，第一链cDNA合成后不需要任何处理，直接进入第二链的合成。
4.所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-timePCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5.本试剂盒足够10次80uL体系的双链cDNA合成反应。
6.如果需要合成全长cDNA，最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。
一管式双链cDNA合成试剂盒运输及保存：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：mRNA提取试剂盒
一管式双链cDNA合成试剂盒使用方法
一：mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂，用户需自备相关试剂。
二：双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中，按下表设置cDNA合成反应：
一管式双链cDNA合成试剂盒注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5uL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3.所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-timePCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。
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