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- 2025年07月13日
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稳定细胞株筛选
筛选稳定细胞系
筛选稳定细胞系的方法：
1、转染质粒后，单克隆方法筛选稳定细胞系
2、慢病毒感染筛选稳定细胞系
慢病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效，是目前主流的稳定细胞系筛选方法。慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达，因此，慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株circRNA /LncRNA过表达和干扰慢病毒。
汉恒生物构建包装的带puromycin抗性的慢病毒，在感染目的细胞后，可通过加入puromycin进行选择性筛选，从而获得稳定表达shRNA或者特定基因的细胞株。我们提供病毒包装服务（您可以自己完成稳态细胞筛选），或者一站式的稳定细胞系的筛选服务
服务流程：
汉恒的优势：
1.种子优良：低代数细胞来源，无支原体无黑胶虫
2.性状稳定：严酷的筛选及靶基因表达验证体系
3.活力无损：严格的建系后连续3代细胞增殖活力评价
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文献和实验用慢病毒筛选稳定细胞株，以G418筛选方法为例，筛选出稳定整合Neomycin抗性基因的细胞系。 A 、 G418 抗生素最优浓度筛选 每种细胞对抗生素的敏感性不同，因此，准备建立稳定细胞系之前，需要确定能够在10-14天杀死细胞的最佳浓度。 方法如下 ： 1、将细胞稀释到1000个细胞/mL，接种到24孔板，每孔1ml。 2、接种后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。3、每隔3天跟换1次培养液，保持G418浓度不变。 4、选择出
Purification of GST fusion proteins in E.coli GSTSugden lab,McArdle Laboratory for Cancer Research,University of Wisconsin-Madison Medical SchoolScreen of GST-Fusion Protein Expression(pGEX system by Amersham: for check clones for expression
Purification of GST fusion proteins in E.coli GST Sugden lab,McArdle Laboratory for Cancer Research ,University of Wisconsin-Madison Medical School Screen of GST-Fusion Protein Expression (pGEX system by Amersham: for check clones
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