登革热病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法

【药品名称】
登革病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
【英文名】
Dengue IgM ELISA Kit
【汉语拼音】
DengGe BingDu IgM KangTi ZhenDuan ShiJiHe(MeiLianMianYiFa)
【正文】
【使用目的】
定性测定人体血清或血浆中登革病毒IgM抗体。
【试验原理】
本品系由Dengue Ag包被的微孔板和酶标记抗人IgM及其他试剂配套组成，应用间接法原理检测人血清或血浆中的Dengue IgM抗体。
【主要组成成份】
1、已包被板 (96孔) 6、浓缩洗涤液一瓶 (25×30ml)
2、阴性对照一瓶 (0.5ml) 7、底物A液一瓶 (6.0ml)
3、阳性对照一瓶 (0.5ml) 8、底物B液一瓶 (6.0ml)
4、酶标记物一瓶 (6.0ml) 9、终止液一瓶 (6.0ml)
5、样品稀释液一瓶 (30ml) 10、封板胶两张
【仪器】
1、 具有405nm、450nm、490nm、630nm波长检测能力的酶标仪。
2、 微孔板用全自动洗扳机。
【样本要求】
1、0.1ml血清或血浆样本足够检测使用。
2、尽量使用新鲜标本，留存样本2－8℃保存不超过10天，避免使用反复多次冻融的样本。
3、不可使用添加叠氮钠防腐剂的样本，影响到辣根过氧化物酶的活性。
【试验方法】
1、 将检测样本用样品稀释液做1:50稀释。(先将10μl血清加入到90μl的样品稀释液中混匀，再将1:10的稀释血清用样品稀释液做1:5稀释充分混匀。标本稀释后应在2小时内使用。)
2、 将25倍浓缩洗涤液加入到720ml(96T)蒸馏水或去离子水中混匀备用。
3、 取出已包被板，加入已稀释好的样本100μl/孔，同时设阴、阳性对照及空白对照各二孔(阴、阳性对照孔分别直接加入相应对照血清100μl/孔，空白对照加入洗涤液100μl/孔)，振荡均匀后，于37℃水浴箱温育40分钟。
4、 温育后，甩去板内液体，用洗涤液注满各孔，静置一分钟后甩干，重复洗涤五次，扣干。
5、 加入酶标记物50μl/孔(空白孔不加)，振荡均匀后，于37℃水浴箱温育30分钟。
6、 温育后，甩去板内液体，用洗涤液注满各孔，静置一分钟后甩干，重复洗涤五次，扣干。
7、 每孔加入底物A、B液各50μl，37℃避光显色10分钟，再加入终止液50μl/孔，于450nm测OD值。
【对试验结果的解释】
1、 检测的阳性对照均值/阴性对照均值(P/N)≧2.1，试验成立。
2、 各样本检测的OD值按:临界值(cut-off)=0.2+阴性对照均值(N<0.05时，按0.05计算)，样品OD值大于临界值为阳性，样品OD值小于临界值为阴性。样品OD值在临界值正负10％范围内为可疑，建议用其他方法复试。
【该试验方法的局限性】
1、 适用于血清或血浆标本(可用0.106mol/L枸橼酸钠、15g/L EDTA-Na₂、1g/L肝素钠等抗凝剂)，不适于其他的体液标本检测。
2、 定性检测标本中是否存有Dengue IgM抗体，再根据临床表现，推断有无患有登革热。
3、 仅能检出总Dengue IgM抗体，不可以鉴定是哪一型Dengue IgM抗体。
【产品性能指标】
以广东省疾病预防控制中心标准品为主要标准，灵敏度可检出刚发病3天的DEN I型弱阳性血清所转换的样本[OD≥0.25(cutoff)]；特异性(阳性30份，阴性40份)检出率达100％；精密性血清(n=10)CV值＜15%。
内部研究表明:溶血、高酯血、高血红蛋白或含枸橼酸钠、EDTA-2Na抗凝剂的样本对检测结果影响不明显；与黄病毒科的HCV病毒和流行性出血热病毒无交叉反应，但与乙型脑炎病毒交叉反应性很低，特异性达95%以上。﹝参考文献:周惠琼，江立敏等.登革重组抗原与登革IgM抗体反应的敏感性和特异性分析.中华微生物学和免疫学杂志，2006，2:168﹞
【注意事项】
1、不同批号的试剂组分不能混用。
2、试剂盒应按含有传染性材料对待。
3、试剂盒应在室温中平衡后再开封启用。
4、为确保结果可靠，阳性对照OD值应大于1.0。
5、用酶标仪读结果时，应以空白孔校零。
6、未用完的包被板应及时用自封袋封存。
【贮存】
试剂盒于2～8℃保存
【有效期】
9个月
【规格】48人份/盒；96人份/盒
【生产企业】 广州健仑生物科技有限公司
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