流行性腮腺炎ELISA检测试剂盒 使用说明书

流行性腮腺炎ELISA检测试剂盒 使用说明书
仅供体外研究使用，不用于临床诊断
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人流行性腮腺炎（EP）的含量。

l有效期：6个月

l保存条件：2-8℃

[实验原理]

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人流行性腮腺炎（EP）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人流行性腮腺炎（EP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

[样本处理及要求]

1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

[试剂盒组成]

什么是流行性腮腺炎?

流行性腮腺炎是由腮腺炎病毒所引起的急性呼吸道传染病，传染性强，可以通过唾液或者口、鼻及咽喉黏膜传播。

传播途径：主要通过呼吸道飞沫传播，也可通过直接接触感染者的唾液传播

以腮腺非化脓性炎症、腮腺区肿痛（局部灼热而不红）为主要临床特征，大多数无明显前驱期症状，少数伴全身不适、肌肉酸痛、头痛、食欲不振、畏寒发热。潜伏期一般为8-30天，平均为18天。

腮腺炎病毒除侵犯腮腺外，还可侵犯神经系统、生殖系统等多系统，严重可致生育力受损、耳聋、视力障碍等后遗症，或危及生命。

不过，绝大多数流行性腮腺炎预后良好，很少发生心肌炎、病毒性脑炎等危及生命的并发症。

这个时间段传染性最强

早期感染者和隐性感染者是流行性腮腺炎的主要传染源。

对腮腺炎病毒未建立免疫力的人群普遍易感。儿童及青少年人群（5-9岁）、免疫力受损人群感染风险相对较高。

在腮腺肿大前6天至发病后9天均具有传染性，但在发病前一两天至发病后5天传染性最强。

虽然流行性腮腺炎主要经呼吸道飞沫传播，但间接接触被病毒污染的物品也会造成传播。

值得注意的是，孕产妇感染者也可通过胎盘传至胎儿，导致流产、胎儿发育畸形。

接种疫苗，做好预防

接种含腮腺炎成分的疫苗，是控制和预防流行性腮腺炎最有效的手段。